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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 菌落PCR的引物怎么确定？
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小阿屈

铜虫 (小有名气)

[交流] 菌落PCR的引物怎么确定？ 已有3人参与

想验证一下质粒是否转入，打算做菌落PCR，可是怎么设计引物？怎么选择？

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1楼 2017-01-10 16:44:59
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山荆子

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
菌落PCR的引物跟你提出来质粒验证的引物是一样的。

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2楼2017-01-10 16:49:09
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小阿屈

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 山荆子 at 2017-01-10 16:49:09
菌落PCR的引物跟你提出来质粒验证的引物是一样的。

质粒是实验室本来就有的，没有验证过，怎么办？怎么设计？

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3楼2017-01-10 16:50:01
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山荆子

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
质粒序列有吧？大小知道的话，提质粒跑胶就好了，如果只想验证有没有转化成功，不用PCR的呀。

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4楼2017-01-10 16:53:53
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hch123

金虫 (正式写手)
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-01-11 07:42:27
其实你抽个质粒做个酶切基本也就判断了，如果你实在太纠结就把你的序列Blast找一段比对结果是空白的地方设个引物，不要太长!
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脚踏实地：遇一个，学一个，会一个。。。
5楼2017-01-10 16:59:01
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小阿屈

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hch123 at 2017-01-10 16:59:01
其实你抽个质粒做个酶切基本也就判断了，如果你实在太纠结就把你的序列Blast找一段比对结果是空白的地方设个引物，不要太长!

哈哈你好聪明！

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6楼2017-01-10 21:19:43
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wkj5257

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
或者在载体靠近片段5端设计一条上游引物，在片段350bp处设计一段下游引物，进行PCR，阳性有带，阴性没带

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分子生物学，未来科技的领导者
7楼2017-01-11 00:09:23
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