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小阿屈

铜虫 (小有名气)

[交流] 菌落PCR的引物怎么确定? 已有3人参与

想验证一下质粒是否转入,打算做菌落PCR,可是怎么设计引物?怎么选择?

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山荆子

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
菌落PCR的引物跟你提出来质粒验证的引物是一样的。

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2楼2017-01-10 16:49:09
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小阿屈

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 山荆子 at 2017-01-10 16:49:09
菌落PCR的引物跟你提出来质粒验证的引物是一样的。

质粒是实验室本来就有的,没有验证过,怎么办?怎么设计?

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3楼2017-01-10 16:50:01
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山荆子

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
质粒序列有吧?大小知道的话,提质粒跑胶就好了,如果只想验证有没有转化成功,不用PCR的呀。

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4楼2017-01-10 16:53:53
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hch123

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-01-11 07:42:27
其实你抽个质粒做个酶切基本也就判断了,如果你实在太纠结就把你的序列Blast找一段比对结果是空白的地方设个引物,不要太长!
脚踏实地:遇一个,学一个,会一个。。。
5楼2017-01-10 16:59:01
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小阿屈

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hch123 at 2017-01-10 16:59:01
其实你抽个质粒做个酶切基本也就判断了,如果你实在太纠结就把你的序列Blast找一段比对结果是空白的地方设个引物,不要太长!

哈哈你好聪明!

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6楼2017-01-10 21:19:43
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wkj5257

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
或者在载体靠近片段5端设计一条上游引物,在片段350bp处设计一段下游引物,进行PCR,阳性有带,阴性没带

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分子生物学,未来科技的领导者
7楼2017-01-11 00:09:23
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