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菌落PCR的引物怎么确定?
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菌落PCR的引物怎么确定?
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想验证一下质粒是否转入,打算做菌落PCR,可是怎么设计引物?怎么选择?
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【求助/交流】求助:重组菌落PCR时遇到的问题,很纠结,非常纠结,极度纠结,在线等
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PCR的小女孩---安涂生
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1楼
2017-01-10 16:44:59
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山荆子
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菌落PCR的引物跟你提出来质粒验证的引物是一样的。
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2楼
2017-01-10 16:49:09
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2楼
:
Originally posted by
山荆子
at 2017-01-10 16:49:09
菌落PCR的引物跟你提出来质粒验证的引物是一样的。
质粒是实验室本来就有的,没有验证过,怎么办?怎么设计?
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3楼
2017-01-10 16:50:01
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质粒序列有吧?大小知道的话,提质粒跑胶就好了,如果只想验证有没有转化成功,不用PCR的呀。
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4楼
2017-01-10 16:53:53
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hch123
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2017-01-11 07:42:27
其实你抽个质粒做个酶切基本也就判断了,如果你实在太纠结就把你的序列Blast找一段比对结果是空白的地方设个引物,不要太长!
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脚踏实地:遇一个,学一个,会一个。。。
5楼
2017-01-10 16:59:01
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5楼
:
Originally posted by
hch123
at 2017-01-10 16:59:01
其实你抽个质粒做个酶切基本也就判断了,如果你实在太纠结就把你的序列Blast找一段比对结果是空白的地方设个引物,不要太长!
哈哈你好聪明!
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6楼
2017-01-10 21:19:43
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wkj5257
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或者在载体靠近片段5端设计一条上游引物,在片段350bp处设计一段下游引物,进行PCR,阳性有带,阴性没带
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分子生物学,未来科技的领导者
7楼
2017-01-11 00:09:23
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