24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 813  |  回复: 5

sai00fuji

金虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】求助:重组菌落PCR时遇到的问题,很纠结,非常纠结,极度纠结,在线等

重组菌落PCR的问题:用通用引物T7和SP6时,没有条带。用自己设计的引物(就是做RT-PCR时的引物)有条带。而且条带长度就是目的基因的长度。这是怎么回事呢?

若说没连上那自己设计的引物怎么能P出条带呢。若说连上了,怎么用T7、SP6就P不出条带呢?

难道是引物问题?

[ Last edited by sai00fuji on 2010-11-9 at 16:06 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gao-feng

铁杆木虫 (著名写手)


sai00fuji(金币+1):有T7 SP6序列 2010-11-10 08:59:31
你质粒上有T7、SP6的序列没有
2楼2010-11-09 19:36:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

topstone

金虫 (正式写手)


sai00fuji(金币+1):没有做,当时是用自己设计的引物P的,没有用空载做阴性对照 2010-11-10 09:00:39
PCR时做阴性对照了吗?小心别是PCR产物污染造成的假阳性结果!
3楼2010-11-09 20:06:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
sai00fuji(金币+1):怎么看引物是否降解?引物是上个月刚买的 2010-11-10 12:49:24
(1)检查重组质粒中是否还有T7和SP6的序列
(2)检测两条通用引物是否降解
(3)附带隐形对照重新PCR
4楼2010-11-10 10:22:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
sai00fuji(金币+1):也是啊,试试去 2010-11-11 11:22:03
可以通过跑琼脂糖凝胶来检测引物是否降解
5楼2010-11-10 14:44:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sai00fuji

金虫 (正式写手)


用空载做阴性对照,T7  SP6引物,还是没有条带
6楼2010-11-11 11:28:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sai00fuji 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +7 张.1 2026-04-05 7/350 2026-04-05 20:40 by 啵啵啵0119
[考研] 298求调剂 +7 manman511 2026-04-05 7/350 2026-04-05 10:29 by 唐沐儿
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-04 12/600 2026-04-05 08:24 by 544594351
[考研] 材料与化工306分找调剂 +12 沧海轻舟e 2026-04-03 13/650 2026-04-04 23:45 by lqwchd
[考研] 材料专硕322分 +11 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-02 11/550 2026-04-04 23:37 by 永字号
[考研] 341求调剂 +3 洛多罗 2026-04-02 4/200 2026-04-04 21:36 by 智能智慧
[考研] 复试调剂 +6 范根培 2026-04-04 6/300 2026-04-04 14:27 by 土木硕士招生
[考研] 280求调剂 +21 咕噜晓晓 2026-04-02 22/1100 2026-04-04 11:12 by 猪会飞
[考研] 本9一志愿2 0854低分专硕286求调剂 +9 芒种111 2026-04-04 9/450 2026-04-04 11:01 by tangruihua
[考研] 301求调剂 +14 A_JiXing 2026-04-01 14/700 2026-04-03 18:31 by ls刘帅
[考研] 330求调剂 +3 白神呜呼呼 2026-04-02 3/150 2026-04-03 10:15 by 蓝云思雨
[考博] 材料工程专业硕士申博 +3 麟正宇 2026-03-30 3/150 2026-04-02 15:04 by greychen00
[考研] 286分调剂 +20 Faune 2026-03-30 22/1100 2026-04-02 13:24 by clyblh
[考研] 0856初试324分求调剂 +6 想上学求调 2026-04-01 6/300 2026-04-02 11:42 by 星空星月
[考研] 324求调剂 +5 想上学求调 2026-04-01 6/300 2026-04-02 10:16 by sanrepian
[考研] 考研调剂 +12 Amber00 2026-03-31 12/600 2026-04-02 09:04 by sanrepian
[考研] 318求调剂 +8 七忆77 2026-04-01 8/400 2026-04-01 10:37 by Jaylen.
[考研] 0710生物学求调剂! +6 叙述文 2026-03-31 6/300 2026-04-01 09:39 by JourneyLucky
[考研] 340求调剂 +4 希望如此i 2026-03-31 4/200 2026-03-31 16:40 by 690616278
[考研] 083000环境科学与工程调剂,总分281 +4 橙子(胜意) 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
信息提示
请填处理意见