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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 有沉淀，溶解不了
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呃嘟嘟

金虫 (小有名气)

[求助] 有沉淀，溶解不了 已有2人参与

提取DNA后，发现有太多RNA,我加1.5ulRNA酶，37℃水浴30min，加DD水到500ul,再加入等体积的氯仿，颠倒15min，12000rpm，10min，再取上清500ul至新管，加入了1/10体积的醋酸钠，加2倍体积的冰乙醇，4℃10min，12000rpm  10min去上清，加70%冰乙醇，（由于太晚，放冰箱过夜），第二天离心，然后干燥，加DD水，溶解，但是总有白色沉淀

有沉淀，溶解不了


有沉淀，溶解不了-1


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1楼 2017-01-03 20:07:59
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草溪河

铁虫 (著名写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-01-04 07:40:38
引用回帖:
2楼: Originally posted by 草溪河 at 2017-01-03 20:17:02
感觉应该是不纯，白色沉淀中不全是DNA

我之前提一种真菌dna的情况和你类似，当时过夜溶解后只吸取溶液使用，忽略不溶沉淀

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3楼2017-01-03 20:19:16
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strmond

铁虫 (小有名气)
DNA没太大的关系，只是杂蛋白，细胞成分没除干净，不影响PCR扩增等实验

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15楼2017-02-19 12:39:54
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普通回帖

草溪河

铁虫 (著名写手)
感觉应该是不纯，白色沉淀中不全是DNA

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2楼2017-01-03 20:17:02
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Nitara

新虫 (正式写手)
我也遇到这种情况了  跑电泳什么的没问题 如果要往下做的话  就要想办法纯化了

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4楼2017-01-03 23:16:24
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呃嘟嘟

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 草溪河 at 2017-01-03 20:17:02
感觉应该是不纯，白色沉淀中不全是DNA

对的，不只是DNA，初步判断是盐离子，并且A260/A230在0.669左右

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5楼2017-01-03 23:35:12
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呃嘟嘟

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 草溪河 at 2017-01-03 20:19:16
我之前提一种真菌dna的情况和你类似，当时过夜溶解后只吸取溶液使用，忽略不溶沉淀
...

我也是提取的真菌的DNA，由于RNA太多，纯化一下，就这样了

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6楼2017-01-03 23:37:07
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呃嘟嘟

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Nitara at 2017-01-03 23:16:24
我也遇到这种情况了  跑电泳什么的没问题 如果要往下做的话  就要想办法纯化了

没有继续往下做，抽提了1次，酒精洗了3次，已经没有DNA了，白做了

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7楼2017-01-03 23:39:05
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潇湘妃子。

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 呃嘟嘟 at 2017-01-03 23:39:05
没有继续往下做，抽提了1次，酒精洗了3次，已经没有DNA了，白做了
...

楼主提的是什么里面的DNA？
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8楼2017-02-17 13:34:30
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呃嘟嘟

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 潇湘妃子。 at 2017-02-17 13:34:30
楼主提的是什么里面的DNA？...

真菌

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9楼2017-02-17 16:38:11
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双鱼座的瓶盖

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 呃嘟嘟 at 2017-01-03 23:35:12
对的，不只是DNA，初步判断是盐离子，并且A260/A230在0.669左右
...

我上次提取的芝麻也是这种情况……

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10楼2017-02-18 16:38:07
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