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Fujiya洋葱

新虫 (初入文坛)

[求助] RNA提取有大量沉淀,求助已有1人参与

RNA提取,用的Trizol+组织块,自动研磨机打碎组织裂解,然后氯仿抽提,异丙醇沉淀。
在沉淀之后就出现了大量的沉淀,1.5ml的管子底下都是白的。
然后酒精清洗,最后DEPC水溶解。
发现大量沉淀都不能溶解,吹打后下层似絮状一般,上层为上清。
用NANOdrop测OD260/280及浓度,OD值基本上都在1.8以下。同一个样测多次每次浓度都不一样。
怀疑是蛋白质污染。
有没有同样遇到过这样问题的大神?你们怎么解决这个情况的?现在这一批样都不敢继续往下做,不知道哪步出了问题。
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生科深似海

新虫 (小有名气)

2楼2015-12-02 21:49:01
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爱情曼陀罗

新虫 (著名写手)

3楼2015-12-03 00:05:27
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Fujiya洋葱

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 生科深似海 at 2015-12-02 21:49:01
组织块弄一点儿就够了

我也猜想是组织太多了。再加上是肝脏组织,大量脂肪的原因。另外想请教下,如果一次性提大量组织的话,是吧组织都拿出来一个个提还是放-80里面多开几次门防止组织冻融?
4楼2015-12-03 18:03:19
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生科深似海

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
最好样品放-80度  可先用饭盒(手提的)盛点液氮  可一次性将多个样品从冰箱中取出 投入液氮中  一个一个提RNA 不担心降解了

发自小木虫Android客户端
5楼2015-12-03 18:38:12
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