应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Western-blot内参问题
51/1返回列表
查看: 1633  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wenky

新虫 (正式写手)

[求助] Western-blot内参问题 已有1人参与

各位大侠好！刚做WB，（1）请问市售GAPDH、β-tubulin或actin内参一抗都所有真核生物能通用吗？还是需要自己做特异性多抗？（2）用刚做的抗兔一抗的血清做了一次WB，用的是重组大肠杆菌，结果杂带很多（注：抗体制备用蛋白由该菌纯化），是因为抗体未纯化的原因吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-12-14 16:36:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

田生帅菜

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wenky: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-12-16 21:41:55
你说的这几个内参基本上都可以用，真核生物比较保守。gapdh常用来做膜蛋白内参，actin比较通用。这几个内参大小不同，可以跟你的目的蛋白分开，这样进行选择。你的第二个问题说的好乱啊，没看懂，你再详细说一下吧

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2016-12-15 17:42:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

田生帅菜

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

又看了一遍。大概懂了。有没有标签抗体试一试呢？大肠杆菌一般都有 his，具体是不是再重复重复吧

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-12-15 17:44:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wenky

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 田生帅菜 at 2016-12-15 17:44:43
又看了一遍。大概懂了。有没有标签抗体试一试呢？大肠杆菌一般都有 his，具体是不是再重复重复吧

多谢指点。又做了一遍，效果还可以，第一次杂带多应该是封闭效果不好所致。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-12-16 21:41:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

田生帅菜

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wenky at 2016-12-16 21:41:10
多谢指点。又做了一遍，效果还可以，第一次杂带多应该是封闭效果不好所致。
...

客气了，

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
5楼2016-12-16 22:38:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wenky 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭