应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » SYBR GREEN 扩增效果不理想，引物二聚体严重，求高人指点。
51/1返回列表
查看: 6230  |  回复: 101
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

neaushuai

木虫 (正式写手)
已领完
SYBR GREEN 扩增效果不理想，引物二聚体严重，求高人指点。
领取红包 (小木虫手机app专属红包)

扫一扫，下载小木虫客户端

小虫最近用SYBR GREEN作qPCR，在用清水做空白对照时，一直起峰。琼脂糖凝胶电泳发现，引物二聚体严重，目地条带模糊。新手一个，求不吝赐教。

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2016-12-13 15:14:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peitaokong

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
以我多年做qPCR的经验。引物二聚体出现，是由多方面造成的。一：模板的问题，a RNA质量不好，包括降解严重等等 b RNA提取过程中，有机试剂没有除尽。如果有机试剂没有除尽，就会造成反转录效果出现问题。最后上机扩增就会出现引物二聚体。 二：引物的问题，这个可以通过扩增曲线和溶解曲线来综合判断。单峰,溶解曲线tm值在85左右，预实验NTC和样本的CT值之差要大于3这些都是衡量引物好坏的因素。希望能够对你有用。
赞一下 回复此楼
96楼2016-12-15 16:30:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 102 个回答
简单回复
zhchzhsh20762楼
2016-12-13 15:14   回复  
neaushuai(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
STM32F4073楼
2016-12-13 15:14   回复  
neaushuai(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
jiehe8884楼
2016-12-13 15:14   回复  
neaushuai(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
paperhunter5楼
2016-12-13 15:14   回复  
neaushuai(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
Rambo90866楼
2016-12-13 15:14   回复  
neaushuai(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
C.Dempsey7楼
2016-12-13 15:14   回复  
neaushuai(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
wumatlab8楼
2016-12-13 15:14   回复  
neaushuai(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
weishuang9楼
2016-12-13 15:14   回复  
neaushuai(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
人生。。初见10楼
2016-12-13 15:14   回复  
neaushuai(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
加油！！11楼
2016-12-13 15:14   回复  
neaushuai(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
sjkzxmc12楼
2016-12-13 15:14   回复  
neaushuai(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
qiukq198913楼
2016-12-13 15:15   回复  
neaushuai(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
35067058014楼
2016-12-13 15:15   回复  
neaushuai(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
查看全部 102 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭