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leilaxx

金虫 (小有名气)

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[求助] 纯化蛋白总是纯不出来已有5人参与

大家好。我按照师兄师姐的方法纯化蛋白，过镍柱后可以洗脱到75ml蛋白溶液，但是过完离子交换柱之后就没蛋白了，请问有哪些原因呢？

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1楼 2016-09-13 01:27:31

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leilaxx

金虫 (小有名气)

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谢谢大家的帮忙！之前有几天没上小木虫所以没及时回复。在师姐的指导下，对破菌，洗杂的buffer都优化了，然后根据蛋白特性破菌前加了pmsf和dna酶，最后拿到了蛋白。因为该蛋白性质原因，一开始我按照自己纯以前别的蛋白的习惯去做，可能洗杂什么的都不是干净，所以导致蛋白过Q柱之后就不知道去哪里了（上样流穿部分不是目的蛋白），再次感谢大家的帮忙！ @hc-material

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