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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 基因克隆时，在抗性板上挑了30个单菌落，37度摇菌7小时，然...
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小鱼1988

铁虫 (小有名气)

[求助] 基因克隆时，在抗性板上挑了30个单菌落，37度摇菌7小时，然... 已有4人参与

基因克隆时，在抗性板上挑了30个单菌落，37度摇菌7小时，然后做了菌落PCR,电泳结果竟然都是假阳性，请问这正常吗？已经重复操作很多次了… @biostar2009

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1楼 2016-08-04 16:23:47
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

菌落PCR，为什么不直接用菌落做？
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4楼2016-08-11 09:14:59
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lcc89

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是酶切的时候质粒没有切开，或者基因的酶切位点和质粒不匹配导致质粒自连。
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2楼2016-08-05 16:40:59
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iris0830

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

正常，我之前不知道做了多少才出来一个真的，貌似跟T载体有关，多半是基因没连上
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3楼2016-08-08 09:50:28
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1992xlliu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

酶切还是T-A克隆？酶切估计是载体酶切不完全自连，T-A的话估计是回收产物中小片段较多
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5楼2016-08-11 11:19:00
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