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基因克隆时,在抗性板上挑了30个单菌落,37度摇菌7小时,然...
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小鱼1988
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专业: 微生物生理与生物化学
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基因克隆时,在抗性板上挑了30个单菌落,37度摇菌7小时,然...
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基因克隆时,在抗性板上挑了30个单菌落,37度摇菌7小时,然后做了菌落PCR,电泳结果竟然都是假阳性,请问这正常吗?已经重复操作很多次了… @
biostar2009
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2016-08-04 16:23:47
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iris0830
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【答案】应助回帖
正常,我之前不知道做了多少才出来一个真的,貌似跟T载体有关,多半是基因没连上
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3楼
2016-08-08 09:50:28
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lcc89
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注册: 2013-03-02
专业: 病毒学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
是不是酶切的时候质粒没有切开,或者基因的酶切位点和质粒不匹配导致质粒自连。
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2016-08-05 16:40:59
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【答案】应助回帖
菌落PCR,为什么不直接用菌落做?
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2016-08-11 09:14:59
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专业: 生物化学
【答案】应助回帖
酶切还是T-A克隆?酶切估计是载体酶切不完全自连,T-A的话估计是回收产物中小片段较多
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5楼
2016-08-11 11:19:00
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