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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

[求助] IPTG诱导后,采用反复冻融的方法提取出蛋白 已有1人参与

加上样缓冲液后煮完离心,发现没有沉淀,请问这是形成了包含体没有啊?

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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 木蠹 at 2016-07-28 04:05:07
亲。。。。包含体只是缠绕堆积的蛋白,加上样缓冲液煮完变性了就不沉淀了。。。。包含体存在会影响活性蛋白的提取效率,一般在蛋白提取后离心取沉淀制备电泳样本跑page检测。不过未完全破碎的细胞碎片中蛋白会影响 ...

不加上样缓冲液前离心看吗

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4楼2016-07-28 07:29:39
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

2楼2016-07-27 11:56:10
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木蠹

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-07-28 08:39:07
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuguiyan at 2016-07-27 11:56:10

亲。。。。包含体只是缠绕堆积的蛋白,加上样缓冲液煮完变性了就不沉淀了。。。。包含体存在会影响活性蛋白的提取效率,一般在蛋白提取后离心取沉淀制备电泳样本跑page检测。不过未完全破碎的细胞碎片中蛋白会影响判断,看你需要吧。

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3楼2016-07-28 04:05:07
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

加完上样液之后为什么会有沉淀呢?如果有包涵体的话,不应该是破碎完之后离心,上清是可溶性蛋白,沉淀可能为包涵体吗?你冻融之后上样,就没办法分了呀
···
5楼2016-07-31 12:41:30
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