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IPTG诱导后,采用反复冻融的方法提取出蛋白
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yuguiyan
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IPTG诱导后,采用反复冻融的方法提取出蛋白
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加上样缓冲液后煮完离心,发现没有沉淀,请问这是形成了包含体没有啊?
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yuguiyan
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3楼
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Originally posted by
木蠹
at 2016-07-28 04:05:07
亲。。。。包含体只是缠绕堆积的蛋白,加上样缓冲液煮完变性了就不沉淀了。。。。包含体存在会影响活性蛋白的提取效率,一般在蛋白提取后离心取沉淀制备电泳样本跑page检测。不过未完全破碎的细胞碎片中蛋白会影响 ...
不加上样缓冲液前离心看吗
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4楼
2016-07-28 07:29:39
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yuguiyan
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【答案】应助回帖
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2016-07-28 08:39:07
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
yuguiyan
at 2016-07-27 11:56:10
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亲。。。。包含体只是缠绕堆积的蛋白,加上样缓冲液煮完变性了就不沉淀了。。。。包含体存在会影响活性蛋白的提取效率,一般在蛋白提取后离心取沉淀制备电泳样本跑page检测。不过未完全破碎的细胞碎片中蛋白会影响判断,看你需要吧。
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3楼
2016-07-28 04:05:07
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【答案】应助回帖
加完上样液之后为什么会有沉淀呢?如果有包涵体的话,不应该是破碎完之后离心,上清是可溶性蛋白,沉淀可能为包涵体吗?你冻融之后上样,就没办法分了呀
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···
5楼
2016-07-31 12:41:30
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