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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】pET-22无法表达？
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paulajjh

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】pET-22无法表达？

如题，我的基因克隆到pET-22上无法表达，但文献报道 pET-32可以表达，请问，这两个载体的区别大吗？有没可能我表达条件不正确？目前采用过夜培养后，加入2mM IPTG诱导。
有老师说，如果pET-22不表达，有可能整个pET系列的都不表达，而我目前仅仅有pET22及pET-28这两个质粒。

请高手指点。
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1楼 2010-12-01 09:10:33
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
paulajjh(金币+1):我的问题不是能不能有活性，而是连蛋白都没有。 2010-12-01 10:09:48
诱导时机一般是培养至OD值0.6-0.8，诱导剂少加点，特别是诱导表达有活性的蛋白，还有诱导温度低点试试看。
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2楼2010-12-01 09:32:31
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paulajjh

木虫 (著名写手)
请问，BL21与TG1的区别？谢谢
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3楼2010-12-01 10:50:52
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xuqingchun33

银虫 (小有名气)
paulajjh(金币+1):直接合成的基因，有检测报告，应该没错吧，不过已经去测序了，等待。。。 2010-12-01 11:37:08
看看读码框对不对
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4楼2010-12-01 11:02:53
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