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paulajjh

木虫 (著名写手)


[交流] 【求助/交流】pET-22无法表达?

如题,我的基因克隆到pET-22上无法表达,但文献报道 pET-32可以表达,请问,这两个载体的区别大吗?有没可能我表达条件不正确?目前采用过夜培养后,加入2mM IPTG诱导。
有老师说,如果pET-22不表达,有可能整个pET系列的都不表达,而我目前仅仅有pET22及pET-28这两个质粒。

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paulajjh(金币+1):我的问题不是能不能有活性,而是连蛋白都没有。 2010-12-01 10:09:48
诱导时机一般是培养至OD值0.6-0.8,诱导剂少加点,特别是诱导表达有活性的蛋白,还有诱导温度低点试试看。
2楼2010-12-01 09:32:31
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paulajjh

木虫 (著名写手)


请问,BL21与TG1的区别?谢谢
3楼2010-12-01 10:50:52
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xuqingchun33

银虫 (小有名气)


paulajjh(金币+1):直接合成的基因,有检测报告,应该没错吧,不过已经去测序了,等待。。。 2010-12-01 11:37:08
看看读码框对不对
4楼2010-12-01 11:02:53
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