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假人人

新虫 (小有名气)

[交流] 两个酶切位点buffer不同 已有16人参与

我在构载体的时候,两个酶切位点的buffer不一样,需要先用一个做酶切,然后跑胶回收后再用另一个酶做酶切,然后再跑胶,再回收,可是当我第二次酶切时由于浓度太低,跑胶是几乎都没带,请问各路大神该怎么办?

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feierorange

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果实在找不到合适的buffer,分步酶切,第一种酶切后,取少量检测,确认切开后,不跑胶,直接回收,在回收产物中加入第二种酶,酶切完成后再最后跑胶。
9楼2016-07-11 14:46:24
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-07-11 07:05:08
可以找一个最适合的buffer,有网站专门匹配的。

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2楼2016-07-11 00:35:14
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

你要知道,你每次切胶回收,都是在损耗的产物

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3楼2016-07-11 00:35:57
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781055707

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1,是提高模板浓度。2.用TAKARA的快酶,不用考虑BUFFER
采菊东篱下,悠然见南山。
4楼2016-07-11 09:51:54
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