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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大质粒转化不长菌
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woaiguozhen

新虫 (初入文坛)

[交流] 大质粒转化不长菌 已有3人参与

各位大牛们，请教一个问题！之前成功将6700左右的目的片段连接到3000左右的载体上得到正确的重组质粒，由于剩的小提质粒不够了，所以打算继续转化。使用的感受态是新产的商品化Trans 5α感受态细胞，质粒是大提后的，所以浓度较高，故稀释10倍后，分别加了一微和两微进感受态。但是转化后就是不长菌落了，重复几次都不长，请问大家谁遇到过这种情况，有什么好的解决办法吗？谢谢了！
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1楼 2016-05-17 22:56:33
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2011sp

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这种情况一定要做一个阳性质粒对照来检测一下感受态细胞的效率

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3楼2016-05-22 07:52:50
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瘸腿老马

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一切都用原来的，如：细胞和培养基等，但要换新鲜的。
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2楼2016-05-19 05:22:41
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popo0625

金虫 (小有名气)
换菌种，试一下stebl3

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认真活每一天
4楼2016-05-22 09:38:59
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