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mikewang777木虫 (小有名气)
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[求助]
重组质粒转化农杆菌问题
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各位大侠， 我做农杆菌的质粒转化试验，结果一个转化子也没有，请有经验的同仁帮忙分析一下： 条件： 冻融转化法 1。阳性对照长有单菌落，对照用质粒是别人的质粒，大小和我的质粒差不多，说明感受态是没问题吧？ 2。质粒是新提的，电泳检测有两条带，都很亮，是不是和超螺旋，或线性，半开环有关 ？ 质粒已经 pcr,酶切检测过了，均出带 3。做了3次，结果都是不长，师姐也做了好几次，都不长，说明应该不是操作的问题吧？ 4。平板也换过，是卡纳抗性，用别人的板也不长，板的问题也不大吧？ 各位兄弟姐妹，我还有什么没考虑到的吗？ 十分迫切的得到答复！！ |
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我觉还是感受态的问题，可以购买呀，如果急用的话。也可能是质粒转化的条件不同，这里有篇文献是讲感受态对转化效率的影响的。希望有帮助。 重组质粒导入根癌农杆菌冻融法的研究.pdf 等2个文件 http://kuai.xunlei.com/d/GLILIOYQTOCX?p=130497 |
2楼2012-07-23 16:23:06
