| 查看: 1286 | 回复: 1 | |||
mikewang777木虫 (小有名气)
|
[求助]
重组质粒转化农杆菌问题
|
|
各位大侠， 我做农杆菌的质粒转化试验，结果一个转化子也没有，请有经验的同仁帮忙分析一下： 条件： 冻融转化法 1。阳性对照长有单菌落，对照用质粒是别人的质粒，大小和我的质粒差不多，说明感受态是没问题吧？ 2。质粒是新提的，电泳检测有两条带，都很亮，是不是和超螺旋，或线性，半开环有关 ？ 质粒已经 pcr,酶切检测过了，均出带 3。做了3次，结果都是不长，师姐也做了好几次，都不长，说明应该不是操作的问题吧？ 4。平板也换过，是卡纳抗性，用别人的板也不长，板的问题也不大吧？ 各位兄弟姐妹，我还有什么没考虑到的吗？ 十分迫切的得到答复！！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 宝贝里 |
» 猜你喜欢
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有136人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
tupac225
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 103 (高中生)
- 金币: 1967.9
- 散金: 20
- 红花: 4
- 帖子: 460
- 在线: 175.4小时
- 虫号: 1533370
- 注册: 2011-12-11
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mikewang777: 金币+5, ★有帮助 2012-07-29 17:30:03
感谢参与，应助指数 +1
mikewang777: 金币+5, ★有帮助 2012-07-29 17:30:03
|
我觉还是感受态的问题，可以购买呀，如果急用的话。也可能是质粒转化的条件不同，这里有篇文献是讲感受态对转化效率的影响的。希望有帮助。 重组质粒导入根癌农杆菌冻融法的研究.pdf 等2个文件 http://kuai.xunlei.com/d/GLILIOYQTOCX?p=130497 |
2楼2012-07-23 16:23:06