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mikewang777木虫 (小有名气)
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[求助]
重组质粒转化农杆菌问题
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各位大侠, 我做农杆菌的质粒转化试验,结果一个转化子也没有,请有经验的同仁帮忙分析一下: 条件: 冻融转化法 1。阳性对照长有单菌落,对照用质粒是别人的质粒,大小和我的质粒差不多,说明感受态是没问题吧? 2。质粒是新提的,电泳检测有两条带,都很亮,是不是和超螺旋,或线性,半开环有关 ? 质粒已经 pcr,酶切检测过了,均出带 3。做了3次,结果都是不长,师姐也做了好几次,都不长,说明应该不是操作的问题吧? 4。平板也换过,是卡纳抗性,用别人的板也不长,板的问题也不大吧? 各位兄弟姐妹,我还有什么没考虑到的吗? 十分迫切的得到答复!! |
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tupac225
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我觉还是感受态的问题,可以购买呀,如果急用的话。也可能是质粒转化的条件不同,这里有篇文献是讲感受态对转化效率的影响的。希望有帮助。 重组质粒导入根癌农杆菌冻融法的研究.pdf 等2个文件 http://kuai.xunlei.com/d/GLILIOYQTOCX?p=130497 |

2楼2012-07-23 16:23:06










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