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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量PCR结果分析
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王华川王华川

金虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR结果分析 已有1人参与

做荧光定量PCR，出来的结果，看不懂。请教各位大神，可以看出那些有用的信息不？万分感谢。

荧光定量PCR结果分析
AKR1C2-1.jpg
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1楼 2016-04-28 14:47:27
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

半仙0356

新虫 (正式写手)
应该还会有一些数值吧？我用的德塔法，有计算模板，

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3楼2016-04-28 20:45:38
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卡维斯

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 王华川王华川 at 2016-04-29 12:55:53
时间紧迫加上实验材料难取，没办法。剩那一个是内参，如此的话，就要把四个结果除以内参再比较就可以了不？望赐教。...

相对定量公式 △△Ct = △Ct(试验样品) — △Ct(基准样品)
△Ct(试验样品) = Ct（试验样品,目的基因） — Ct（试验样品,内参基因）
△Ct(基准样品) = Ct（基准样品,目的基因） — Ct（基准样品,内参基因）
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王华川王华川
8楼2016-04-29 21:19:19
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普通回帖

卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
王华川王华川: 金币+13, ★★★很有帮助 2016-04-28 21:50:38
里面可用的信息主要是Ct值，其他大多都是参数设置
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2楼2016-04-28 19:49:37
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王华川王华川

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-28 19:49:37
里面可用的信息主要是Ct值，其他大多都是参数设置

怎么说呢，看理论介绍貌似看得懂。真看到它就蒙了。按理，Ct值要结合标准曲线看才有价值吧。老师说这个要有内参，但貌似看不出来。现在问题就是：仅有Ct值有什么用呢？
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4楼2016-04-28 21:54:02
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王华川王华川

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 半仙0356 at 2016-04-28 20:45:38
应该还会有一些数值吧？我用的德塔法，有计算模板，

实验有五个数据对应五个曲线。两组实验组，两组对照组。虽然重复量不大，凑合着算下差异显著否。但是剩那一个曲线拿来干嘛呢？
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5楼2016-04-28 21:57:54
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
王华川王华川: 金币+2, ★★★很有帮助 2016-04-29 12:53:11
引用回帖:
5楼: Originally posted by 王华川王华川 at 2016-04-28 21:57:54
实验有五个数据对应五个曲线。两组实验组，两组对照组。虽然重复量不大，凑合着算下差异显著否。但是剩那一个曲线拿来干嘛呢？...

一般单个样品需要有至少三个技术重复，重复少了可信度小了就。
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6楼2016-04-29 08:20:21
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王华川王华川

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-29 08:20:21
一般单个样品需要有至少三个技术重复，重复少了可信度小了就。...

时间紧迫加上实验材料难取，没办法。剩那一个是内参，如此的话，就要把四个结果除以内参再比较就可以了不？望赐教。
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7楼2016-04-29 12:55:53
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Roylin

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 王华川王华川 at 2016-04-29 12:55:53
时间紧迫加上实验材料难取，没办法。剩那一个是内参，如此的话，就要把四个结果除以内参再比较就可以了不？望赐教。...

我们是用CT值对较，大于内参也就是比值大于1.表示基因上调表达，小于1.表示基因下调表达

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9楼2016-04-29 23:45:30
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Roylin

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by Roylin at 2016-04-29 23:45:30
我们是用CT值对较，大于内参也就是比值大于1.表示基因上调表达，小于1.表示基因下调表达
...

对了，有个公式的，不仅仅是ct值，具体的太久了忘记了，可以查看文献，松墨天牛表皮蛋白的克隆和表达

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王华川王华川
10楼2016-04-29 23:48:16
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