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王华川王华川

金虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR结果分析已有1人参与

做荧光定量PCR,出来的结果,看不懂。请教各位大神,可以看出那些有用的信息不?万分感谢。

荧光定量PCR结果分析
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半仙0356

新虫 (正式写手)

应该还会有一些数值吧?我用的德塔法,有计算模板,

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3楼2016-04-28 20:45:38
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卡维斯

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 王华川王华川 at 2016-04-29 12:55:53
时间紧迫加上实验材料难取,没办法。剩那一个是内参,如此的话,就要把四个结果除以内参再比较就可以了不?望赐教。...

相对定量公式 △△Ct = △Ct(试验样品) — △Ct(基准样品)
△Ct(试验样品) = Ct(试验样品,目的基因) — Ct(试验样品,内参基因)
△Ct(基准样品) = Ct(基准样品,目的基因) — Ct(基准样品,内参基因)

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

8楼2016-04-29 21:19:19
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
王华川王华川: 金币+13, ★★★很有帮助 2016-04-28 21:50:38
里面可用的信息主要是Ct值,其他大多都是参数设置
2楼2016-04-28 19:49:37
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王华川王华川

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-28 19:49:37
里面可用的信息主要是Ct值,其他大多都是参数设置

怎么说呢,看理论介绍貌似看得懂。真看到它就蒙了。按理,Ct值要结合标准曲线看才有价值吧。老师说这个要有内参,但貌似看不出来。现在问题就是:仅有Ct值有什么用呢?
4楼2016-04-28 21:54:02
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王华川王华川

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 半仙0356 at 2016-04-28 20:45:38
应该还会有一些数值吧?我用的德塔法,有计算模板,

实验有五个数据对应五个曲线。两组实验组,两组对照组。虽然重复量不大,凑合着算下差异显著否。但是剩那一个曲线拿来干嘛呢?
5楼2016-04-28 21:57:54
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
王华川王华川: 金币+2, ★★★很有帮助 2016-04-29 12:53:11
引用回帖:
5楼: Originally posted by 王华川王华川 at 2016-04-28 21:57:54
实验有五个数据对应五个曲线。两组实验组,两组对照组。虽然重复量不大,凑合着算下差异显著否。但是剩那一个曲线拿来干嘛呢?...

一般单个样品需要有至少三个技术重复,重复少了可信度小了就。
6楼2016-04-29 08:20:21
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王华川王华川

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-29 08:20:21
一般单个样品需要有至少三个技术重复,重复少了可信度小了就。...

时间紧迫加上实验材料难取,没办法。剩那一个是内参,如此的话,就要把四个结果除以内参再比较就可以了不?望赐教。
7楼2016-04-29 12:55:53
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Roylin

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 王华川王华川 at 2016-04-29 12:55:53
时间紧迫加上实验材料难取,没办法。剩那一个是内参,如此的话,就要把四个结果除以内参再比较就可以了不?望赐教。...

我们是用CT值对较,大于内参也就是比值大于1.表示基因上调表达,小于1.表示基因下调表达

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9楼2016-04-29 23:45:30
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Roylin

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by Roylin at 2016-04-29 23:45:30
我们是用CT值对较,大于内参也就是比值大于1.表示基因上调表达,小于1.表示基因下调表达
...

对了,有个公式的,不仅仅是ct值,具体的太久了忘记了,可以查看文献,松墨天牛表皮蛋白的克隆和表达

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

10楼2016-04-29 23:48:16
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