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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 毕赤酵母表达问题
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预言abc

禁虫 (初入文坛)
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1楼 2016-04-19 10:58:05
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zywys2009

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

毕赤表达不同蛋白的效率差别极大，我遇到过最高的能到3g/L，最低的只能通过酶活来测定（基本就是毫克级的了），对于后一种只有在纯化后才上蛋白电泳。
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3楼2016-05-09 16:52:18
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brown-eyes

新虫 (初入文坛)
沉淀里有蛋白很正常，上清没有目标蛋白吗，你wb看过了吗？
如果没有，可能的原因有很多
1.没有分泌出。
2.时间太短。
。。。
-80保存，减少降解。
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2楼2016-04-21 15:24:04
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wzn1992324

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我做的是取72小时的菌液，但是也没有条带，很着急，，表达量多少跟我取菌液量有关吗？我取了1ml的菌液，但是什么目的条带都看不见，反而对照空菌GS115诱导的杂蛋白很多，，不知道是啥原因
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4楼2017-04-12 14:20:10
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曾小旭

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wzn1992324 at 2017-04-12 14:20:10
我做的是取72小时的菌液，但是也没有条带，很着急，，表达量多少跟我取菌液量有关吗？我取了1ml的菌液，但是什么目的条带都看不见，反而对照空菌GS115诱导的杂蛋白很多，，不知道是啥原因

我的和楼上的情况一样，你可以把上清过柱子纯化再wb

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5楼2017-04-13 07:58:44
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