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毕赤酵母表达问题
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1楼
2016-04-19 10:58:05
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brown-eyes
新虫
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在线: 2.7小时
虫号: 3440247
注册: 2014-09-25
专业: 微生物生理与生物化学
沉淀里有蛋白很正常,上清没有目标蛋白吗,你wb看过了吗?
如果没有,可能的原因有很多
1.没有分泌出。
2.时间太短。
。。。
-80保存,减少降解。
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2楼
2016-04-21 15:24:04
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zywys2009
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虫号: 847826
注册: 2009-09-14
专业: 抗体工程学
【答案】应助回帖
毕赤表达不同蛋白的效率差别极大,我遇到过最高的能到3g/L,最低的只能通过酶活来测定(基本就是毫克级的了),对于后一种只有在纯化后才上蛋白电泳。
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3楼
2016-05-09 16:52:18
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wzn1992324
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虫号: 6301469
注册: 2017-04-12
专业: 病毒学
【答案】应助回帖
我做的是取72小时的菌液,但是也没有条带,很着急,,表达量多少跟我取菌液量有关吗?我取了1ml的菌液,但是什么目的条带都看不见,反而对照空菌GS115诱导的杂蛋白很多,,不知道是啥原因
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4楼
2017-04-12 14:20:10
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曾小旭
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虫号: 6056126
注册: 2017-03-19
专业: 蛋白质组学
引用回帖:
4楼
:
Originally posted by
wzn1992324
at 2017-04-12 14:20:10
我做的是取72小时的菌液,但是也没有条带,很着急,,表达量多少跟我取菌液量有关吗?我取了1ml的菌液,但是什么目的条带都看不见,反而对照空菌GS115诱导的杂蛋白很多,,不知道是啥原因
我的和楼上的情况一样,你可以把上清过柱子纯化再wb
发自小木虫Android客户端
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5楼
2017-04-13 07:58:44
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