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木虫 (正式写手)

[交流] pcr反应体系扩增出目的基因

25ul pcr反应体系扩增出目的基因,换50ul反应体系没有扩增出目的基因,不知道是怎么回事?

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卡维斯

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
多扩几个25体系不就行了?
2楼2016-04-15 20:38:40
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夏冰莲

新虫 (小有名气)

3楼2016-04-16 14:32:35
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七只蛋挞

新虫 (初入文坛)

4楼2016-04-16 17:22:35
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自荐的毛遂

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
50ul相对25来说虽然只是提高了两倍,但是体系也是变了的。体系的变化在一些情况下可能是会影响pcr结果的,建议你看一下模版的原因,模版再摸索一下,也可以继续用25ul的体系,没有什么太大影响,对切胶回收来说。我当时也出现过这种情况,25ul有目的条带,50ul切胶回收时没有条带,最后就是用25ul体系做的切胶回收。有时候有结果就好,没必要去太在意这个,有摸索这个条件的时间,还可以去做很多其他的实验。
认真去做好每一件你认为该做的事情
5楼2016-04-16 19:37:33
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夏冰莲

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你dna电泳图呢?

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6楼2016-04-17 14:55:13
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醉_梦

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
换一种酶,或者多做几个25体系
7楼2016-04-17 16:10:22
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tfytli

金虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
并不是单纯的体系扩增,模板量和引物也要相应改变

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最令人信服的话莫过于一本正经的胡说八道,外加一点数据。
8楼2016-04-18 13:14:05
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

我们一般是以10uL和25uL位基础倍数,不再提高反应体系的体积
9楼2016-04-19 15:43:54
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