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smilenini

木虫 (初入文坛)

[求助] 急问!不同引物的PCR反应体系必须相同吗?

请教各位,在做逆转录PCR时,当需要扩增的引物有很多对时,必须用同一个扩增体系来扩增吗?如果有的引物在此体系扩增不好,反复试退火温度都不行时,能换体系吗? 跟其他产物还有可比性吗?
另外,当同一组同一个组织部位扩增产物种类比较多时,电泳时每个扩增产物都要跟内参吗?还是将内参及其他目的基因在不同的胶上电泳出,最后不同的目的基因全跟同一个内参比较?如果有的引物杂带较多,需要做touchdown PCR,而有的引物直接PCR就可以,那二者还有可比性么?
不知道大家明白我的意思没,表述有些混乱,请大家不吝赐教!!!
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