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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr反应体系扩增出目的基因
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i760912798

木虫 (正式写手)

[交流] pcr反应体系扩增出目的基因

25ul pcr反应体系扩增出目的基因，换50ul反应体系没有扩增出目的基因，不知道是怎么回事？

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1楼 2016-04-14 23:00:38
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卡维斯

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
多扩几个25体系不就行了？
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2楼2016-04-15 20:38:40
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夏冰莲

新虫 (小有名气)
稀释一下dna

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3楼2016-04-16 14:32:35
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七只蛋挞

新虫 (初入文坛)
那就用25微升啊

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4楼2016-04-16 17:22:35
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自荐的毛遂

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
50ul相对25来说虽然只是提高了两倍，但是体系也是变了的。体系的变化在一些情况下可能是会影响pcr结果的，建议你看一下模版的原因，模版再摸索一下，也可以继续用25ul的体系，没有什么太大影响，对切胶回收来说。我当时也出现过这种情况，25ul有目的条带，50ul切胶回收时没有条带，最后就是用25ul体系做的切胶回收。有时候有结果就好，没必要去太在意这个，有摸索这个条件的时间，还可以去做很多其他的实验。
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认真去做好每一件你认为该做的事情
5楼2016-04-16 19:37:33
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夏冰莲

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你dna电泳图呢？

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6楼2016-04-17 14:55:13
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醉_梦

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
换一种酶，或者多做几个25体系
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7楼2016-04-17 16:10:22
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tfytli

金虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
并不是单纯的体系扩增，模板量和引物也要相应改变

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最令人信服的话莫过于一本正经的胡说八道，外加一点数据。
8楼2016-04-18 13:14:05
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)
我们一般是以10uL和25uL位基础倍数，不再提高反应体系的体积
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9楼2016-04-19 15:43:54
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