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melody VS

木虫 (著名写手)

[求助] 求助:有关HPLC柱压,这样情况正常吗?谢谢大家~~ 已有4人参与

各位前辈们好,岛津LC,跑液相的时候柱压有16Mpa,进样后会升到18MPa,总感觉偏高,而且用水冲洗,流速0.3min/mL时柱压也有8mpa,换用甲醇冲洗,柱压降为4mpa,但是很快的在1MPa~4MPa范围内波动,每次做用的是同样的流动相,有时候是11-13Ma,有时候15-16Mpa,总感觉怪怪的,有经验的前辈们帮忙看下这个正常吗?请求指导,谢谢大家~~~

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平凡简单,不忘初心
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zongyuan

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
melody VS: 金币+8, ★★★很有帮助, 多谢指导~~ 2016-04-10 23:19:03
先确定是否是仪器的问题,如果是主动阀阀芯拆卸下来热水或异丙醇超声清洗
如果是柱子的问题,能用就用,不能用换新的,一般柱子没有修复的
柱子在使用过程,注意低比例有机水冲洗过度,高比例有机水保存,可增加使用寿命
2楼2016-04-10 17:15:10
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jwdongyn

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by melody VS at 2016-04-11 12:30:58
我们的是C18柱,可以用超纯水冲洗,我不是专业搞分析的,仪器什么的结构不是很清楚,不太敢乱拆,就是想看看是不是正常现象,看来还是有问题的,多谢指导了~~~
...

绝大多数C18柱都不能用纯水相冲洗吧 太伤柱子了

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6楼2016-04-11 12:54:09
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saiyachenf

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
melody VS: 金币+8, ★★★很有帮助, 多谢多谢 2016-04-11 12:33:29
首先想问一下你的色谱柱可以用纯水做流动相吗?
根据你的叙述存在两个问题
1、压力偏高
2、压力不稳定
    对于压力偏高,你可以看一下是柱子的问题还是仪器本身的问题。你可以把色谱柱拆下来,连上检测器,跑流动相,如果没有压力,则说明仪器没有堵,柱压偏高,这时候需要你根据你的柱子选择合适的溶剂慢慢冲柱子;若有压力,则说明仪器有堵塞,你需要慢慢盘查
    对于压力不稳定,可能原因比较多
1、观察管路中是否有气泡
2、入口单向阀是否有问题
3、压力传感器是否有问题
你也可以直接给仪器维修的打电话,向他们请教

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

每天笑一笑
4楼2016-04-11 09:23:13
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jwdongyn

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
melody VS: 金币+5, ★★★很有帮助, 多谢多谢~~~ 2016-04-11 20:10:29
引用回帖:
7楼: Originally posted by melody VS at 2016-04-11 13:03:53
啊?这样吗,我们实验室一直教的方法都是做完后用纯水冲洗六小时以上,再用甲醇冲洗,好多年了,我没来前就这样的,一直传下来的,那方便问下你们是怎么弄的吗?多谢多谢~~
...

能不能用水相冲可以看下柱子的说明书,冲洗缓冲盐可以用5%的有机相冲

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14楼2016-04-11 15:53:22
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saiyachenf

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by melody VS at 2016-04-11 13:03:53
啊?这样吗,我们实验室一直教的方法都是做完后用纯水冲洗六小时以上,再用甲醇冲洗,好多年了,我没来前就这样的,一直传下来的,那方便问下你们是怎么弄的吗?多谢多谢~~
...

做完后冲洗柱子的方法是要根据你所用的流动相来选择的,如果流动相中有缓冲盐,做完后就需要用高比例的水做流动相冲洗,一般20-30个柱体积即可,然后再用高比例的有机溶剂做流动相冲洗;如果没有缓冲盐,则没那么麻烦,用高比例的有机溶剂或直接用有机溶剂冲洗即可。
一般来说,大多数的C18都不可直接用100%纯水做流动相冲洗柱子的,要么你们实验室的C18柱是那种可以直接用100%纯水做流动相的?你可以看一下柱子型号然后百度上搜一搜相关的信息
每天笑一笑
15楼2016-04-11 17:04:18
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melody VS

木虫 (著名写手)

引用回帖:
20楼: Originally posted by 893168288 at 2016-04-11 22:05:29
就是
...

我百度了下我们那款柱子说是可以用100%的水冲,吓死我了,还好可以,让我去质疑教我使仪器的人,没底气吖,况且她脾气不太好,不好看来这是个基本问题,我都不知道,今天真是受教了,谢谢大家了~~~

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平凡简单,不忘初心
21楼2016-04-11 23:53:46
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普通回帖

melody VS

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zongyuan at 2016-04-10 17:15:10
先确定是否是仪器的问题,如果是主动阀阀芯拆卸下来热水或异丙醇超声清洗
如果是柱子的问题,能用就用,不能用换新的,一般柱子没有修复的
柱子在使用过程,注意低比例有机水冲洗过度,高比例有机水保存,可增加使 ...

首先非常感谢你的热心解答,其实我特别想再问下如何才能确定到底是不是柱子的问题,我只是会单纯的测样,其他的不是很懂,不知道这个问题会不会很浪费你时间呢,还是很感谢~~

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平凡简单,不忘初心
3楼2016-04-10 23:15:12
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melody VS

木虫 (著名写手)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by saiyachenf at 2016-04-11 09:23:13
首先想问一下你的色谱柱可以用纯水做流动相吗?
根据你的叙述存在两个问题
1、压力偏高
2、压力不稳定
    对于压力偏高,你可以看一下是柱子的问题还是仪器本身的问题。你可以把色谱柱拆下来,连上检测器,跑流 ...

我们的是C18柱,可以用超纯水冲洗,我不是专业搞分析的,仪器什么的结构不是很清楚,不太敢乱拆,就是想看看是不是正常现象,看来还是有问题的,多谢指导了~~~

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平凡简单,不忘初心
5楼2016-04-11 12:30:58
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melody VS

木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by jwdongyn at 2016-04-11 12:54:09
绝大多数C18柱都不能用纯水相冲洗吧 太伤柱子了
...

啊?这样吗,我们实验室一直教的方法都是做完后用纯水冲洗六小时以上,再用甲醇冲洗,好多年了,我没来前就这样的,一直传下来的,那方便问下你们是怎么弄的吗?多谢多谢~~

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平凡简单,不忘初心
7楼2016-04-11 13:03:53
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xtgongyzh

新虫 (初入文坛)

柱子的内径是多少?460mm?感觉这个数值算正常啊。做之前最好都用纯有机相冲洗柱子,稳定之后再换成测试比例…不稳定有可能是还没稳定就开始测试了。

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8楼2016-04-11 13:07:33
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上海波粒

铜虫 (正式写手)


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引用回帖:
7楼: Originally posted by melody VS at 2016-04-11 13:03:53
啊?这样吗,我们实验室一直教的方法都是做完后用纯水冲洗六小时以上,再用甲醇冲洗,好多年了,我没来前就这样的,一直传下来的,那方便问下你们是怎么弄的吗?多谢多谢~~
...

OL Appel C18-AQ类似这样的C18可以用纯水,否则的话会损失大量柱效的,用纯水目的洗去盐等水溶性物质,如果这些不存在,最好是用纯有机相去清洗。
9楼2016-04-11 14:08:34
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melody VS

木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by xtgongyzh at 2016-04-11 13:07:33
柱子的内径是多少?460mm?感觉这个数值算正常啊。做之前最好都用纯有机相冲洗柱子,稳定之后再换成测试比例…不稳定有可能是还没稳定就开始测试了。

5um  4.6*150mm 这个规格的柱子,我每次跑基线时直接用的是测试比例的流动相,有问题吗?多谢多谢
平凡简单,不忘初心
10楼2016-04-11 14:57:19
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