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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求助：有关HPLC柱压，这样情况正常吗？谢谢大家～～
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melody VS

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 上海波粒 at 2016-04-11 14:08:34
OL Appel C18-AQ类似这样的C18可以用纯水，否则的话会损失大量柱效的，用纯水目的洗去盐等水溶性物质，如果这些不存在，最好是用纯有机相去清洗。...

用的是岛津原装的柱子，是Intertsil ODS-SP 这个牌子的，用水洗就是为了洗去缓冲盐，多谢指导~~~~
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平凡简单，不忘初心
11楼2016-04-11 14:59:58
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xtgongyzh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by melody VS at 2016-04-11 14:57:19
5um  4.6*150mm 这个规格的柱子，我每次跑基线时直接用的是测试比例的流动相，有问题吗？多谢多谢...

直接用测试比例达到平衡所需要的时间较长，对柱子也会有损害，因为刚开始压力会比较大，用混合相会使压力更大，造成柱流失

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12楼2016-04-11 15:03:13
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melody VS

木虫 (著名写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by xtgongyzh at 2016-04-11 15:03:13
直接用测试比例达到平衡所需要的时间较长，对柱子也会有损害，因为刚开始压力会比较大，用混合相会使压力更大，造成柱流失
...

嗯嗯，好的，我下次直接先用甲醇平衡，然后再换测试相，这样可以吧？难怪每次跑基线都跑半天，非常感谢，
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平凡简单，不忘初心
13楼2016-04-11 15:14:19
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jwdongyn

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
melody VS: 金币+5, ★★★很有帮助, 多谢多谢~~~ 2016-04-11 20:10:29
引用回帖:
7楼: Originally posted by melody VS at 2016-04-11 13:03:53
啊？这样吗，我们实验室一直教的方法都是做完后用纯水冲洗六小时以上，再用甲醇冲洗，好多年了，我没来前就这样的，一直传下来的，那方便问下你们是怎么弄的吗？多谢多谢～～
...

能不能用水相冲可以看下柱子的说明书，冲洗缓冲盐可以用5%的有机相冲

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14楼2016-04-11 15:53:22
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saiyachenf

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by melody VS at 2016-04-11 13:03:53
啊？这样吗，我们实验室一直教的方法都是做完后用纯水冲洗六小时以上，再用甲醇冲洗，好多年了，我没来前就这样的，一直传下来的，那方便问下你们是怎么弄的吗？多谢多谢～～
...

做完后冲洗柱子的方法是要根据你所用的流动相来选择的，如果流动相中有缓冲盐，做完后就需要用高比例的水做流动相冲洗，一般20-30个柱体积即可，然后再用高比例的有机溶剂做流动相冲洗；如果没有缓冲盐，则没那么麻烦，用高比例的有机溶剂或直接用有机溶剂冲洗即可。
一般来说，大多数的C18都不可直接用100%纯水做流动相冲洗柱子的，要么你们实验室的C18柱是那种可以直接用100%纯水做流动相的？你可以看一下柱子型号然后百度上搜一搜相关的信息
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每天笑一笑
15楼2016-04-11 17:04:18
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lionpeter

铜虫 (小有名气)
我觉得问题不大 看一下每次进样的面积峰高理论踏板数是否一样

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123
16楼2016-04-11 17:42:21
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melody VS

木虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by jwdongyn at 2016-04-11 15:53:22
能不能用水相冲可以看下柱子的说明书，冲洗缓冲盐可以用5%的有机相冲
...

好的好的，多谢指导了，
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平凡简单，不忘初心
17楼2016-04-11 20:10:06
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melody VS

木虫 (著名写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by saiyachenf at 2016-04-11 17:04:18
做完后冲洗柱子的方法是要根据你所用的流动相来选择的，如果流动相中有缓冲盐，做完后就需要用高比例的水做流动相冲洗，一般20-30个柱体积即可，然后再用高比例的有机溶剂做流动相冲洗；如果没有缓冲盐，则没那么麻 ...

嗯嗯，好的，我想再问下一般高比例的水含量为多少算高呢？楼上的小伙伴有提到5%，和大家交流后觉的我们真的好不严谨，受教了，拜谢
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平凡简单，不忘初心
18楼2016-04-11 20:14:15
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melody VS

木虫 (著名写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by lionpeter at 2016-04-11 17:42:21
我觉得问题不大 看一下每次进样的面积峰高理论踏板数是否一样

不同次做峰面积差距是挺大的，但是我们是手动进样，不知道是不是自己手法的问题~~~多谢多谢
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平凡简单，不忘初心
19楼2016-04-11 20:19:01
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893168288

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jwdongyn at 2016-04-11 12:54:09
绝大多数C18柱都不能用纯水相冲洗吧 太伤柱子了
...

就是

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20楼2016-04-11 22:05:29
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