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prthefu

木虫 (著名写手)

[交流] pcr电泳图，如何解？？？ 已有21人参与

下面两个图是我扩增后的电泳图，两个没有什么差别，唯一不同的是，第一个图中我把模板稀释了一倍，下面的没有稀释，第二个图可以模糊的看到我的目的条带。
但是我想问，为什么那些杂带那么多啊

pcr电泳图，如何解？？？


pcr电泳图，如何解？？？-1


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nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything
1楼 2016-03-22 08:15:01
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534720018

至尊木虫 (著名写手)
★
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你这个拖尾很严重啊，可能模板降解了

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18楼2016-03-24 10:38:57
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永恒的微笑

新虫 (小有名气)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-03-22 08:51:18
可能是你样品有问题，还有就是你引物有问题。如果换个样品没有这种现象，就是你样品的问题。

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2楼2016-03-22 08:19:55
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prthefu

木虫 (著名写手)
补的这张照片可能多多少少可以看到目的条带的大概位置

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3楼2016-03-22 08:21:00
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prthefu

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 永恒的微笑 at 2016-03-22 08:19:55
可能是你样品有问题，还有就是你引物有问题。如果换个样品没有这种现象，就是你样品的问题。

什么叫样品的问题？
还有，我的引物是新合成的，之前那一对引物当中，反向引物的开头第二个碱基错了，所以，我只是把第二个碱基G变成C，又重新做的，不知道为什么跑出来就是这样的带了
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4楼2016-03-22 08:23:31
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永恒的微笑

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我之前有遇到这种情况，刚提出来的样品可以P出明亮单一的条带，过了段时间就出现你这种情况。

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5楼2016-03-22 09:30:10
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mmmwxd

至尊木虫 (著名写手)
样品问题吧

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上下求索为求人生真谛左右顾盼方得世间真情
6楼2016-03-22 09:50:21
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ken19860823

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
做一个对照，用错误的引物来扩。排除下引物外的其他因素，因为你之前扩出来过

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做基因修饰的老菜鸡
7楼2016-03-22 10:11:03
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prthefu

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by ken19860823 at 2016-03-22 10:11:03
做一个对照，用错误的引物来扩。排除下引物外的其他因素，因为你之前扩出来过

不是引物的问题，我之前就是用一对正反引物来测，发现目的条带位置对，但是测序结果表明在终止密码子出有一个碱基错误，后来才发现是我反向引物设计错了，对应终止密码子的位置我写错了一个碱基，所以，后来讲那个改正后，重新合成的引物，但是，用新引物再P的时候，跑出的条带就是什么那个样子了，不知道为什么····
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8楼2016-03-22 19:36:15
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lipo2014

新虫 (初入文坛)
★
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楼主，你用得是什么模板啊？还有浓度是多少啊？
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9楼2016-03-22 21:33:14
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兰兰园丁

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的结果是弥散的，估计是你的模板降解了

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10楼2016-03-23 00:14:24
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