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prthefu

木虫 (著名写手)

[交流] pcr电泳图,如何解??? 已有21人参与

下面两个图是我扩增后的电泳图,两个没有什么差别,唯一不同的是,第一个图中我把模板稀释了一倍,下面的没有稀释,第二个图可以模糊的看到我的目的条带。
但是我想问,为什么那些杂带那么多啊

pcr电泳图,如何解???


pcr电泳图,如何解???-1


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534720018

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你这个拖尾很严重啊,可能模板降解了

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18楼2016-03-24 10:38:57
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普通回帖

永恒的微笑

新虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-03-22 08:51:18
可能是你样品有问题,还有就是你引物有问题。如果换个样品没有这种现象,就是你样品的问题。

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2楼2016-03-22 08:19:55
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prthefu

木虫 (著名写手)

补的这张照片可能多多少少可以看到目的条带的大概位置

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3楼2016-03-22 08:21:00
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prthefu

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 永恒的微笑 at 2016-03-22 08:19:55
可能是你样品有问题,还有就是你引物有问题。如果换个样品没有这种现象,就是你样品的问题。

什么叫样品的问题?
还有,我的引物是新合成的,之前那一对引物当中,反向引物的开头第二个碱基错了,所以,我只是把第二个碱基G变成C,又重新做的,不知道为什么跑出来就是这样的带了
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4楼2016-03-22 08:23:31
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永恒的微笑

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我之前有遇到这种情况,刚提出来的样品可以P出明亮单一的条带,过了段时间就出现你这种情况。

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5楼2016-03-22 09:30:10
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mmmwxd

至尊木虫 (著名写手)

上下求索为求人生真谛左右顾盼方得世间真情
6楼2016-03-22 09:50:21
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ken19860823

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
做一个对照,用错误的引物来扩。排除下引物外的其他因素,因为你之前扩出来过

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做基因修饰的老菜鸡
7楼2016-03-22 10:11:03
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prthefu

木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by ken19860823 at 2016-03-22 10:11:03
做一个对照,用错误的引物来扩。排除下引物外的其他因素,因为你之前扩出来过

不是引物的问题,我之前就是用一对正反引物来测,发现目的条带位置对,但是测序结果表明在终止密码子出有一个碱基错误,后来才发现是我反向引物设计错了,对应终止密码子的位置我写错了一个碱基,所以,后来讲那个改正后,重新合成的引物,但是,用新引物再P的时候,跑出的条带就是什么那个样子了,不知道为什么····
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8楼2016-03-22 19:36:15
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lipo2014

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主,你用得是什么模板啊?还有浓度是多少啊?
9楼2016-03-22 21:33:14
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兰兰园丁

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的结果是弥散的,估计是你的模板降解了

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10楼2016-03-23 00:14:24
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