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oceansr

新虫 (初入文坛)

[交流] 基因插入pET3载体

完整的基因两端要加粘性末端。请问这粘性末端根据什么设计长什么样子

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oceansr

新虫 (初入文坛)

粘性末端是与启动子,终止子连接的吗

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2楼2016-03-21 15:29:25
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原海亮

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个加粘性末端是什么概念?是想酶切后的那种么?

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
3楼2016-03-21 16:25:42
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施子墨

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们也有这种,加的那个粘性末端是说明书上写的,。直接把加在两端

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4楼2016-03-21 18:04:01
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本帖仅楼主可见
5楼2016-03-21 18:22:07
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oceansr

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-21 16:25:42
这个加粘性末端是什么概念?是想酶切后的那种么?

订购基因插在pET载体的T7间来表达蛋白,我插在T7里的一个酶切位点上。基因序列组成就是 粘性末端加要表达的蛋白基因加标签加粘性末端。正确吗?我随便选了一个Haml的酶

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6楼2016-03-22 11:55:40
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原海亮

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
oceansr: 金币+10 2016-03-22 14:04:23
引用回帖:
6楼: Originally posted by oceansr at 2016-03-22 11:55:40
订购基因插在pET载体的T7间来表达蛋白,我插在T7里的一个酶切位点上。基因序列组成就是 粘性末端加要表达的蛋白基因加标签加粘性末端。正确吗?我随便选了一个Haml的酶
...

你所谓的粘性末端应该是指酶切位点吧,酶切位点选择,要看你想把标签加在蛋白的哪一端,pET系列载体可以加C端和N端,具体图谱上有,然后注意你的终止密码子,依据不同的实验要求来决定是否携带。关于你选择的那个酶,我没什么印象,建议选择实验室常用的内切酶,而且最好双酶切。

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
7楼2016-03-22 12:05:28
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oceansr

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-22 12:05:28
你所谓的粘性末端应该是指酶切位点吧,酶切位点选择,要看你想把标签加在蛋白的哪一端,pET系列载体可以加C端和N端,具体图谱上有,然后注意你的终止密码子,依据不同的实验要求来决定是否携带。关于你选择的那个酶 ...

BamHI

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8楼2016-03-22 13:29:05
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