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oceansr

新虫 (初入文坛)

[交流] 基因插入pET3载体

完整的基因两端要加粘性末端。请问这粘性末端根据什么设计长什么样子

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1楼 2016-03-21 15:22:06
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oceansr

新虫 (初入文坛)
粘性末端是与启动子，终止子连接的吗

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2楼2016-03-21 15:29:25
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原海亮

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这个加粘性末端是什么概念？是想酶切后的那种么？

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天空才是极限，我有信心飞的更高！
3楼2016-03-21 16:25:42
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施子墨

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们也有这种，加的那个粘性末端是说明书上写的，。直接把加在两端

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4楼2016-03-21 18:04:01
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匿名
本帖仅楼主可见
5楼2016-03-21 18:22:07
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oceansr

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-21 16:25:42
这个加粘性末端是什么概念？是想酶切后的那种么？

订购基因插在pET载体的T7间来表达蛋白，我插在T7里的一个酶切位点上。基因序列组成就是 粘性末端加要表达的蛋白基因加标签加粘性末端。正确吗？我随便选了一个Haml的酶

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6楼2016-03-22 11:55:40
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原海亮

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
oceansr: 金币+10 2016-03-22 14:04:23
引用回帖:
6楼: Originally posted by oceansr at 2016-03-22 11:55:40
订购基因插在pET载体的T7间来表达蛋白，我插在T7里的一个酶切位点上。基因序列组成就是 粘性末端加要表达的蛋白基因加标签加粘性末端。正确吗？我随便选了一个Haml的酶
...

你所谓的粘性末端应该是指酶切位点吧，酶切位点选择，要看你想把标签加在蛋白的哪一端，pET系列载体可以加C端和N端，具体图谱上有，然后注意你的终止密码子，依据不同的实验要求来决定是否携带。关于你选择的那个酶，我没什么印象，建议选择实验室常用的内切酶，而且最好双酶切。

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oceansr
天空才是极限，我有信心飞的更高！
7楼2016-03-22 12:05:28
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oceansr

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-22 12:05:28
你所谓的粘性末端应该是指酶切位点吧，酶切位点选择，要看你想把标签加在蛋白的哪一端，pET系列载体可以加C端和N端，具体图谱上有，然后注意你的终止密码子，依据不同的实验要求来决定是否携带。关于你选择的那个酶 ...

BamHI

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8楼2016-03-22 13:29:05
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