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scofield111

银虫 (正式写手)

[求助] 双酶切质粒图切成这样, 已有2人参与

Marker,是1000的ladder,1,3是EcoRI和HindIII切得质粒,理论一个7000多,一个几个bp,2是原质粒,双酶切37℃,4h,10ul的体系,1ul buffer,0.2ul的EcoRI和HindIII,0.2质粒,8.4的ddH2O。
问题1,为什么marker分不出来,凝胶是1%的,该怎样调整?
问题2,为什么酶切成分条段的?
上图,谢谢各位老师师兄的回答,非常感谢!

双酶切质粒图切成这样,
@R][EZ6)I9NNI`1JL}Z02QQ.png
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scofield111

银虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 骆明亮 at 2016-03-14 12:44:56
双酶切怎么是这样啊,我之前做的是甜柿DNA双酶切,不是这样的吧

应该是只有两个条带,或一个条带

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9楼2016-03-14 14:15:04
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我傻傻分不清你说的123是指哪个泳道,最好能标明下。你质粒的浓度也够高了,0.2做酶切就能这么亮的条带,可以稀释做下酶切,你说marker分不开什么意思,你图上的那两个条带多的不是marker么,感觉分开的还好吧。

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
2楼2016-03-14 11:55:08
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scofield111

银虫 (正式写手)

sorry, 自左向右是marker,1,2,3
3楼2016-03-14 11:58:38
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scofield111

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-14 11:55:08
我傻傻分不清你说的123是指哪个泳道,最好能标明下。你质粒的浓度也够高了,0.2做酶切就能这么亮的条带,可以稀释做下酶切,你说marker分不开什么意思,你图上的那两个条带多的不是marker么,感觉分开的还好吧。
...

最左边的是marker,然后第一个和第三个才是双酶切后的,第二个是原质粒
4楼2016-03-14 12:00:14
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