| 查看: 1570 | 回复: 10 | ||
scofield111银虫 (正式写手)
|
[求助]
双酶切质粒图切成这样， 已有2人参与
|
|
Marker，是1000的ladder，1,3是EcoRI和HindIII切得质粒，理论一个7000多，一个几个bp，2是原质粒，双酶切37℃，4h，10ul的体系，1ul buffer，0.2ul的EcoRI和HindIII,0.2质粒，8.4的ddH2O。 问题1，为什么marker分不出来，凝胶是1%的，该怎样调整？ 问题2，为什么酶切成分条段的？ 上图，谢谢各位老师师兄的回答，非常感谢！  @R][EZ6)I9NNI`1JL}Z02QQ.png |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有149人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于Hind II 与Xho I酶切连接的问题，求大神指导
已经有13人回复
- 把DNA变成乐高玩具，想怎么拼就怎么拼！
已经有10人回复
- 质粒跑出这样的电泳图可以割胶回收吗？
已经有26人回复
- 为什么我的质粒酶切成这样有弥散带
已经有1人回复
- 请教大家质粒构建问题
已经有3人回复
- 质粒酶切拖尾，附图。
已经有3人回复
- （侯氏出品）StepByStep学习核酸序列分析软件DNAssist1.0
已经有19人回复
- （侯氏出品）双酶切连接反应之全攻略
已经有89人回复
- 【求助/交流】菌液PCR的经验
已经有6人回复
- 【求助/交流】PCR产物酶切后，电泳时遇到的的问题，真心求教！
已经有9人回复
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
我傻傻分不清你说的123是指哪个泳道，最好能标明下。你质粒的浓度也够高了，0.2做酶切就能这么亮的条带，可以稀释做下酶切，你说marker分不开什么意思，你图上的那两个条带多的不是marker么，感觉分开的还好吧。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-03-14 11:55:08
scofield111
银虫 (正式写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 1718
- 散金: 268
- 红花: 7
- 帖子: 740
- 在线: 156.4小时
- 虫号: 3108528
- 注册: 2014-04-02
- 专业: 生物化工与食品化工
3楼2016-03-14 11:58:38
scofield111
银虫 (正式写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 1718
- 散金: 268
- 红花: 7
- 帖子: 740
- 在线: 156.4小时
- 虫号: 3108528
- 注册: 2014-04-02
- 专业: 生物化工与食品化工
4楼2016-03-14 12:00:14
scofield111
银虫 (正式写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 1718
- 散金: 268
- 红花: 7
- 帖子: 740
- 在线: 156.4小时
- 虫号: 3108528
- 注册: 2014-04-02
- 专业: 生物化工与食品化工
5楼2016-03-14 12:02:44
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
|
marker分离效果不好，一方面可以减少上样量，另一方面不知道你用的是什么染料，我们之前用biored对这些大片段marker染色效果不好。你如果不标明我还真以为那些条带多就是marker呢，你那两个酶是单克隆位点么，质粒酶切量可以稍微加大些，这样酶切是为了处理载体么？ 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-03-14 12:11:15
7楼2016-03-14 12:44:16
骆明亮 
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 568.7
- 散金: 25
- 帖子: 198
- 在线: 28.4小时
- 虫号: 3553049
- 注册: 2014-11-22
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
8楼2016-03-14 12:44:56
scofield111
银虫 (正式写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 1718
- 散金: 268
- 红花: 7
- 帖子: 740
- 在线: 156.4小时
- 虫号: 3108528
- 注册: 2014-04-02
- 专业: 生物化工与食品化工
9楼2016-03-14 14:15:04
wang2568
银虫 (小有名气)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 293.8
- 帖子: 76
- 在线: 55.8小时
- 虫号: 2134701
- 注册: 2012-11-19
- 性别: GG
- 专业: 肿瘤研究体系新技术
10楼2016-03-14 17:10:44
100