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scofield111银虫 (正式写手)
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双酶切质粒图切成这样， 已有2人参与
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Marker，是1000的ladder，1,3是EcoRI和HindIII切得质粒，理论一个7000多，一个几个bp，2是原质粒，双酶切37℃，4h，10ul的体系，1ul buffer，0.2ul的EcoRI和HindIII,0.2质粒，8.4的ddH2O。 问题1，为什么marker分不出来，凝胶是1%的，该怎样调整？ 问题2，为什么酶切成分条段的？ 上图，谢谢各位老师师兄的回答，非常感谢！  @R][EZ6)I9NNI`1JL}Z02QQ.png |
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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我傻傻分不清你说的123是指哪个泳道，最好能标明下。你质粒的浓度也够高了，0.2做酶切就能这么亮的条带，可以稀释做下酶切，你说marker分不开什么意思，你图上的那两个条带多的不是marker么，感觉分开的还好吧。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-03-14 11:55:08
scofield111
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5楼2016-03-14 12:02:44
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【答案】应助回帖
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marker分离效果不好，一方面可以减少上样量，另一方面不知道你用的是什么染料，我们之前用biored对这些大片段marker染色效果不好。你如果不标明我还真以为那些条带多就是marker呢，你那两个酶是单克隆位点么，质粒酶切量可以稍微加大些，这样酶切是为了处理载体么？ 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-03-14 12:11:15
7楼2016-03-14 12:44:16
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