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日落沙发

新虫 (小有名气)

[求助] iptg诱导大肠杆菌表达 已有2人参与

看有的帖子中说,iptg如果诱导时间过长,会抑制大肠杆菌生长。
那么,我们如果在刚开始养细菌时就加入iptg,到最后od也是到了0.6,其实细菌数目也是到了合适的范围。
那早加iptg会对细菌有什么影响呢?
求解答,求解答,求解答

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海大的猫

银虫 (初入文坛)

2楼2016-03-10 15:26:22
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日落沙发

新虫 (小有名气)

3楼2016-03-10 23:12:45
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日落沙发

新虫 (小有名气)

4楼2016-03-10 23:12:51
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一刀do

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不利于菌的生长,iptg加入的时间一般在最终OD的0.3左右
5楼2016-03-11 15:41:43
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梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)

iptg是诱导乳糖操纵子表达的,表达的是操纵子下游的目的基因(不是繁殖需要的蛋白产物),而生长初期应以菌体繁殖为主,需要生长必须的蛋白,加强操纵子的表达可能会与管家基因的表达形成竞争,所以要等到对数生长期,菌量足够,再开始诱导表达,当然这只是我的猜测

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6楼2016-03-11 22:48:46
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日落沙发

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 一刀do at 2016-03-11 15:41:43
不利于菌的生长,iptg加入的时间一般在最终OD的0.3左右

最终od乘以30%=加入iptg时的od?

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7楼2016-03-11 23:34:55
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日落沙发

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 梅太奇阿拉干 at 2016-03-11 22:48:46
iptg是诱导乳糖操纵子表达的,表达的是操纵子下游的目的基因(不是繁殖需要的蛋白产物),而生长初期应以菌体繁殖为主,需要生长必须的蛋白,加强操纵子的表达可能会与管家基因的表达形成竞争,所以要等到对数生长期, ...

谢谢~

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8楼2016-03-11 23:35:09
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一刀do

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 日落沙发 at 2016-03-11 23:34:55
最终od乘以30%=加入iptg时的od?
...

嗯,我现在30L和150L发酵罐是这么做的,貌似还可以往后拖一拖,这个也有待实验
9楼2016-03-12 12:06:13
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乐事猫

新虫 (小有名气)

induce的时间一般需要做一个最优的安排,目的是使目的产物产量最大,越早和越晚都不利。需要实验论证induction策略

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10楼2016-03-12 12:12:16
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