试验目的：原核表达病毒囊膜糖蛋白，制备多抗前期研究：这个病毒囊膜糖蛋白目前没有别人做过表达...问题2：如果添加连接肽，可以使用soe-pcr的方法对两个片段进行连接吗？还是有更好的方法呢？

SOE-pcr设计上下臂引物时，在F1和R2加酶切位点。载体为Pksv7.我就是问一个比较蠢得问题，选择酶切位点时候，先后顺序是怎么样的，在载体上不是有个方向嘛！我想选择PST1和BamH1,谁加在F1?谁...

[info1]FXuinfo'.1.'][info2]SOEPCRanditsApplicationinGeneticEngineeringinfo'.2.'][info3]《MolecularPlantBreeding》info'.3.'][info4]2006info'.4.'][info5]no...

上下游同源臂，和中间的抗性基因已经得到，目前遇到的问题是三个基因混合，PCR时链接不上，到底是哪里的问题呢？我用的primerstarmax酶，引物设计时有15bp的overlap，三个基因的混合比例也...

求助SOE–PCR基因敲除的操作要点，应该在注意哪些关键的，新手，求解

basedassembly）2.1SOE&...CPEC原理如下图：基本反应原理是PCR，但是要插入的DNA片段和质粒片段互为PCR引物，当过了一个“失活-粘接-延伸”的循环后，完整的环状质粒就可以形成，但会留下两个...

我用于SOE-PCR的引物有40bp的重叠区，退火温度分别是64度和68度。实在是不知道什么原因了，100ng的模板和50ng的模板都试过了，两两连接也试过了，可都是不行，做了十多次了。头疼啊，有做过...

目的基因是通过SOE-PCR做的，中间为SfiI酶切位点.挑单克隆后，重组质粒要比原先的质粒小，而且SfiI切不开。或许有人说这是假阳性，我也知道，但奇怪的在下面。我用载体上的另一个酶切位点...

如题，overlappingPCR与重叠延伸PCR（splicingbyoverlapextension）的区别在哪里呢，我看着怎么差不多呢？如果做点饱和突变的话那个比较好一点？对应的筛选策略能有什么呀？求各位大神相助...

本人准备将两端基因连接在一起，一段长1620bp，另一端长106bp，不知道用SOE-PCR能否将他们连接在一起。1、107bp做pcr容易扩吗，产生引物二聚体的话怎么回收？2、我的引物设计是否合适？重叠...

将3段PCR产物，分别为775bp，1186bp，602bp，用SOE-PCR连接起来，共长2563bp，现在想测序验证连起来的3个片段是否正确，那我是直接PCR产物测序了？还是克隆测序，克隆测序的化用T载体可以吗...

最近想做单增李斯特菌中某一个基因的敲除，在构建载体时想把目的基因的上游，下游连在载体上，并在上下游基因之间连一个抗生素抗性基因，以便筛选，SOE-PCR的引物怎么设计呀？还有这3个片段...

如果三个片段中，两头的是200多bp,中间的是4200多bp，可不可行呢？成功几率会有多少呢？

最近在做重叠延伸PCR，但是现实是骨感的埃我用mixture做的pcr，不知是否有影响？两个小片段都能够P出来，但是无法overlap。做overlap的时候我是加入片段1和2约75ng，不知量是多还是少？先做...

引物12:1000bp左右；引物34:500bp左右；重叠部分长度：40bp左右；反应条件：50-52℃退火45s，延伸7min，一开始10-15个循环，然后加了1和4引物，30-40个循环；得到的电泳结果总是：出现非...

各位有没有做过重叠PCR的，一般两端的重叠序列要多长bp才比较好呢？另外，想在一个基因的一段加入一段序列，设计了68bp的长引物，一段与此基因有15bp重叠，成功的几率大不大呢？