24小时热门版块排行榜    

查看: 1122  |  回复: 2

huanheihuan

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因敲除中SOE-PCR引物的设计及载体的构建

最近想做单增李斯特菌中某一个基因的敲除,在构建载体时想把目的基因的上游,下游连在载体上,并在上下游基因之间连一个抗生素抗性基因,以便筛选,SOE-PCR的引物怎么设计呀?还有这3个片段怎么连在一起啊,谢谢啦,我是新手啊,多谢了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

serena1205

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

分别p出三段再连接,可通过添加酶切位点将3段连接也可作重叠PCR,抗性基因扩增可先查找基因序列,再用primer5.0设计引物
2楼2013-03-17 14:42:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huanheihuan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by serena1205 at 2013-03-17 14:42:10
分别p出三段再连接,可通过添加酶切位点将3段连接也可作重叠PCR,抗性基因扩增可先查找基因序列,再用primer5.0设计引物

怎样设计重叠引物啊?谢谢,谢谢啦
3楼2013-03-18 09:02:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 huanheihuan 的主题更新
信息提示
请填处理意见