应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 基因敲除后，鉴定突变体引物如何设计
51/1返回列表
查看: 2917  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

绝尘51

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因敲除后，鉴定突变体引物如何设计

我想用Red系统敲除大肠杆菌中的一段序列，敲除后，如何鉴定突变体，使用根据被敲除序列设计的吗？如果用突变体基因组进行pcr时，没有目标产物出现，就是阳性，证明基因被敲除了吗？望各位大师帮帮忙
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-10-11 09:41:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hippo_li

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流问题 2012-10-11 15:59:09
绝尘51: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-14 15:33:22
在敲除序列两端设计引物，敲除前和敲除后pcr扩增的片段大小应该会不一样，比较一下就知道敲除了没有。最好不要用扩增不出来作为阳性，因为pcr扩增不出来可能与其他因素有关。
赞一下 回复此楼
2楼2012-10-11 10:30:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
绝尘51: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-14 15:33:30
不行，用目标基因两侧序列和标签内部两侧序列，设计引物，可以同时p出两个序列可以确定为阳性，如需进一步验证需测序。
赞一下 回复此楼
相信自己
3楼2012-10-11 10:32:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

绝尘51

新虫 (初入文坛)
标签内部两侧序列？是根据抗性基因本身设定的吗
赞一下 回复此楼
4楼2012-10-14 15:31:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nlh1985428

新虫 (初入文坛)
在一篇文献中看到 E. coli strain SH1200(glpT phoR ugpA704::Tn10)，请问各位大师括号中的注释是什么意思？
赞一下 回复此楼
5楼2013-02-21 15:40:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 绝尘51 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭