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新虫 (初入文坛)

[求助] 基因敲除后，鉴定突变体引物如何设计

我想用Red系统敲除大肠杆菌中的一段序列，敲除后，如何鉴定突变体，使用根据被敲除序列设计的吗？如果用突变体基因组进行pcr时，没有目标产物出现，就是阳性，证明基因被敲除了吗？望各位大师帮帮忙

1楼 2012-10-11 09:41:15

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金虫 (小有名气)

★ ★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流问题 2012-10-11 15:59:09
绝尘51: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-14 15:33:22

在敲除序列两端设计引物，敲除前和敲除后pcr扩增的片段大小应该会不一样，比较一下就知道敲除了没有。最好不要用扩增不出来作为阳性，因为pcr扩增不出来可能与其他因素有关。

2楼2012-10-11 10:30:35

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