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最后发表
生物科学
紧急补救!WB阴性对照问题的快速解决方案&...
我的应急洗涤法:将
TBST
浓度从0.1%提高到0.2%每次洗涤时间从5分钟延长到10分钟增加洗涤次数(至少5次以上)洗涤时摇床速度调快一些中期优化:一周内可实施的改进策略1.更换抗体批次或品牌同...
毕合生物2024
2025-10-21 08:06
生物科学
缓冲液选择指南:实验成功的关键决策
缓冲液的基础知识:TBS、
TBST
、PBS、PBST的成分与pH值差异实验又翻车了?背景一片黑?条带弱到看不见?可能是你的缓冲液没选对哦!作为实验室的"幕后英雄",缓冲液的选择直接关系到你实验...
毕合生物2024
2025-10-11 08:35
医学
WB实验翻车现场?一文搞定常见问题+急救指南!
增加洗涤次数(
TBST
洗3×10分钟);更换高特异性抗体。膜污染:手套接触膜或试剂杂质残留。??急救:全程戴手套,镊子夹取膜边缘;过滤缓冲液!?注意:若背景呈“斑块状”,可能是转膜时...
MDL科研
2025-07-14 06:57
休闲灌水
EMSA检测实验步骤
凝胶迁移实验(EMSA)用于...检测-非放射性标记:转膜后的尼龙膜用含5%脱脂奶粉的
TBST
封闭1小时,洗膜后与链霉亲和素-HRP孵育1小时,再次洗膜,加入化学发光底物,在凝胶成像系统中曝光成像。
乐奥贝(实验外
2025-06-27 02:51
休闲灌水
Western Blot(WB)检测实验流程
WesternBlot(WB)检测实验流程2四、封闭转膜结束后,将PVDF膜取出,放入含有5%脱脂奶粉的
TBST
缓冲液中,室温封闭1-2小时,以减少非特异性结合。五、一抗孵育1.?稀释一抗:根据一抗说明书,...
乐奥贝(实验外
2025-06-15 01:23
休闲灌水
Western Blot(WB)检测实验流程
孵育结束后,用
TBST
缓冲液洗膜3次,每次10分钟。六、二抗孵育将膜放入相应的HRP标记的二抗稀释液中,室温摇床孵育1-2小时,使二抗与一抗特异性结合。孵育结束后,用
TBST
缓冲液洗膜3-5次,...
乐奥贝(实验外
2025-05-20 11:34
生物科学
western blot蛋白凝胶电泳
滤纸-胶-NC膜-滤纸-海绵-白色一面,插入清洗过的电泳槽,倒入1*Buffer,倒入百分之五脱脂奶粉封闭一小时,(一抗孵育),将膜放入自封袋中,加入抗体,4度过夜,室温摇床用1*
TBST
洗膜三次,...
huangyan.88.
2024-09-18 02:45
生物科学
干货分享|你的生物实验室的缓冲液,是这些吗?
TBST
缓冲液
TBST
中含有Tris-HCl,NaCl,tween20这三种物质,是做WesternBlotting中常用的一种洗膜缓冲液。目的是洗掉非特异性吸附的蛋白质,并且维持一个接近的天然环境。图片细胞培养常用...
科研战神·王
2024-05-09 05:54
医学
你的生物实验室的缓冲液,是这些吗?
TBST
缓冲液
TBST
中含有Tris-HCl,NaCl,tween20这三种物质,是做WesternBlotting中常用的一种洗膜缓冲液。目的是洗掉非特异性吸附的蛋白质,并且维持一个接近的天然环境。图片细胞培养常用...
医学验证123
2024-04-19 05:17
分子生物
干货分享|你的生物实验室的缓冲液,是这些吗?
TBST
缓冲液
TBST
中含有Tris-HCl,NaCl,tween20这三种物质,是做WesternBlotting中常用的一种洗膜缓冲液。目的是洗掉非特异性吸附的蛋白质,并且维持一个接近的天然环境。平?盐溶液是细胞...
科研顾问_Gu
2024-04-17 12:42
医学
吐温20在WB中的作用是什么?
Westernblot的洗液
TBST
是实验室常用的配制液体,对于
TBST
的配方也基本上相差不多,其中配方中就有一种组分是Tween-20,一种黄色或琥珀色澄明的油状液体,具有特殊的臭气和微弱苦味。...
超困困狗g
2024-03-29 12:14
生物科学
吐温20在WB中的作用是什么?
Westernblot的洗液
TBST
是实验室常用的配制液体,对于
TBST
的配方也基本上相差不多,其中配方中就有一种组分是Tween-20,一种黄色或琥珀色澄明的油状液体,具有特殊的臭气和微弱苦味。...
科研战神·王
2024-01-23 12:56
分子生物
干货分享|吐温20在WB中的作用是什么?
Westernblot的洗液
TBST
是实验室常用的配制液体,对于
TBST
的配方也基本上相差不多,其中配方中就有一种组分是Tween-20,一种黄色或琥珀色澄明的油状液体,具有特殊的臭气和微弱苦味。...
MDL谭焕焕
2024-01-22 02:30
生物科学
分享:吐温20在WB中的作用是什么?
Westernblot的洗液
TBST
是实验室常用的配制液体,对于
TBST
的配方也基本上相差不多,其中配方中就有一种组分是Tween-20,一种黄色或琥珀色澄明的油状液体,具有特殊的臭气和微弱苦味。...
minmin13
2024-01-22 01:43
药学
荧光偏振筛选化合物
各位大佬,我按照文献的荧光偏振方法,50nM的荧光肽,与浓度递增的蛋白结合,测的偏振值最低是20mP,最高是40mP,文献的最高mP是150,请问是那里出了问题?我的缓冲液是
TBST
a5641320
2023-10-27 04:14
分子生物
western blot蛋白凝胶电泳
滤纸-胶-NC膜-滤纸-海绵-白色一面,插入清洗过的电泳槽,倒入1*Buffer,倒入百分之五脱脂奶粉封闭一小时,(一抗孵育),将膜放入自封袋中,加入抗体,4度过夜,室温摇床用1*
TBST
洗膜三次,...
实验助手
2023-02-01 07:29
生物科学
western blot蛋白凝胶电泳
滤纸-胶-NC膜-滤纸-海绵-白色一面,插入清洗过的电泳槽,倒入1*Buffer,倒入百分之五脱脂奶粉封闭一小时,(一抗孵育),将膜放入自封袋中,加入抗体,4度过夜,室温摇床用1*
TBST
洗膜三次,...
987293587
2022-12-29 06:09
生物科学
WB实验蛋白印迹形态非常不规则
本人快开题了,最近在做WB检测内源性蛋白的时候,使用15%蛋白胶,半干转PVDF膜,5%脱脂乳封闭1小时,一抗孵育1小时,2抗孵育1小时,之间均使用
TBST
洗3次,每次10分钟。显影的时候,条带...
Mr_K°
2022-11-14 07:57
新药研发
western blot蛋白凝胶电泳
滤纸-胶-NC膜-滤纸-海绵-白色一面,插入清洗过的电泳槽,倒入1*Buffer,倒入百分之五脱脂奶粉封闭一小时,(一抗孵育),将膜放入自封袋中,加入抗体,4度过夜,室温摇床用1*
TBST
洗膜三次,...
987293587
2022-08-19 08:37
休闲灌水
WB实验干货-实验介绍、蛋白提取、蛋白定量
待目的蛋白和抗体充分结合后,用
TBST
洗脱液洗脱掉多余未结合的一抗,加入带有HRP标记的对应二抗,这样,我们的蛋白+一抗+二抗形成一个复合物,加以化学发光液,有靶蛋白的位置就会产生荧光...
科邦_小邦
2022-08-11 11:48
生物科学
求助关于WB重复性差的问题。
5.
tbst
洗5min*3次;6.二抗用过1:1000和1:500的感觉差不多,该出不来还是出不来,确定种属是没有加错的;7.
tbst
10min*3次;8.ecl反应三分钟胶片曝光,压过半小时也还是没有,内参是有的。...
719600567
2022-01-18 02:59
生物科学
外泌体相关研究文献分享,轻松读完一篇文献(十二)
最后,在用ClarityWesternECLSubstrate孵育之前,用
TBST
洗涤膜3次(每次5min)。图像拍摄是使用590nm滤光片的5200Multiimager。对于二分式SEC中洗脱1和洗脱2上的IB,考虑到目标蛋白的丰度,...
NanoFCMlxq
2022-01-06 11:10
硕博家园
做WB时稀释二抗的BSA是用超纯水而不是用
TBST
配制的,会有什么...
跑出的结果是这样,正常不?
雾亥killy
2022-01-06 04:32
硕博家园
PBST需要高温高压灭菌吗?
做WB,经常用
TBST
洗膜、配液,所以想问下这个需不需要灭菌。
雾亥killy
2021-11-30 10:37
生物科学
外泌体相关研究文献分享,轻松读完一篇文献(十)
在室温下,将膜在含有5%脱脂奶粉的封闭缓冲液1×
TBST
中封闭1小时,然后在4℃下与一抗孵育过夜。过量的一抗用
TBST
洗涤三次来除去。接下来,将膜与二抗在室温下孵育1小时,随后在室温下用...
NanoFCMlxq
2021-10-23 08:26
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