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作者
最后发表
生物科学
WB实验避坑指南:系统性防控蛋白降解,让条带清晰可重复
还原剂:添加
DTT
(终浓度50mM)或β-巯基乙醇(终浓度5%),防止蛋白二硫键形成导致的聚集与降解;螯合剂:EDTA(终浓度2mM)可螯合金属离子,抑制金属依赖性蛋白酶活性。三、操作条件控制...
基础科研平台
2025-12-04 01:39
生物科学
导致蛋白质沉淀/聚集的关键因素
还有氧化还原环境变化一个含有多个半胱氨酸的转录因子,我没有及时加入
DTT
,让它暴露在空气中过夜,第二天发现形成了大量二硫键交联的聚合物。生物因素:蛋白自身的"性格"问题有些蛋白天生...
毕合生物2024
2025-10-24 10:11
生物科学
蛋白纯化大作战!添加剂选对,效率翻倍
还原剂:拆二硫键的“工具人”,别忘了后续处理还原剂比如
DTT
、β-巯基乙醇,专管蛋白的“二硫键麻烦”。二硫键是把双刃剑:能帮蛋白稳住结构,但有时候会让蛋白片段互相缠绕,影响纯化——...
毕合生物2024
2025-09-11 07:43
休闲灌水
EMSA检测实验步骤
EDTA、
DTT
、甘油、BSA等,pH通常7.5-8.0)、聚丙烯酰胺凝胶(依据核酸片段大小选择合适浓度,一般4-10%)、电泳缓冲液(如0.5×TBE)、上样缓冲液(含甘油、溴酚蓝等)、脱色液(乙醇:乙酸:...
乐奥贝(实验外
2025-06-27 02:51
文献求助
求CNKI期刊论文一篇
96...
zhanglinso
2025-03-26 01:07
生物科学
Caspase-2活性分析试剂盒(比色法)实验操作步骤
WorkingReactionBuffer(1×):使用前,用去离子水稀释到ReactionBuffer(1×),再加入
DTT
(最终浓度:每1mLReactionBuffer(1×)加10?LDTT(100×)),置于冰上;4℃保存。Ac-VDQQD-pNA(4mM)...
Abbkine亚科因
2025-01-23 07:20
分析
巯基氨基酸分析
我的分析体系只能在水碱性体系,尝试金纳米富集,但无法脱去(
DTT
试了,但不太行),正在尝试Cu离子富集。如果有大佬知道有什么高含量样品就更好了。万分感谢救救毕业焦虑的孩子吧
顾辛烈ahh
2024-12-26 02:40
生物科学
干货分享|RNA m6A甲基化修饰和特定基因m6A位点的检测方法
FTO用于将m6A氧化为中间产物hm6A,hm6A进一步与二硫苏糖醇(
DTT
)转化为稳定的N6-二硫代硫醇甲基腺苷(dm6A)。然后用生物素标记dm6A以富集含有原始m6A的RNA片段。对富集的RNA进行测序以...
chance℃
2024-08-07 03:59
医学
科研干货|13种蛋白提取方法,赶快收藏手慢无!
BufferA的配制:终浓度母液配40Ml(10ml)溶液所需的量HepesPH7.910mM1M400uL(100ul)MgCl21.5mM2M30uL(7.5ul)KCl10mM250mM1.6mL(400ul)
DTT
0.5mM0.1M200uL(50ul)剩余体积用ddH2O补足至要求体积!...
科研虫子小助手
2024-07-17 02:10
医学
科研干货|13种蛋白提取方法,赶快收藏手慢无!
BufferA的配制:终浓度母液配40Ml(10ml)溶液所需的量HepesPH7.910mM1M400uL(100ul)MgCl21.5mM2M30uL(7.5ul)KCl10mM250mM1.6mL(400ul)
DTT
0.5mM0.1M200uL(50ul)剩余体积用ddH2O补足至要求体积!...
科研虫子小助手
2024-07-12 03:42
生物材料
降冰片烯与
DTT
紫外交联反应求助!
换了两种引发剂都不成胶,这个反应对ph有要求吗,谢谢
8点88
2024-06-06 02:25
分子生物
干货分享|蛋白定量的3种常用方法
Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,如:K?、Na?、Mg??离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、EDTA、
DTT
、TCEP和β-巯基乙醇等。但需要注意的是:由于高浓度洗涤...
科研顾问_Gu
2024-06-03 07:46
分子生物
终极攻略|WB内参的选择
Bradford法敏感度最高,且与一些列干扰Lowry、BCA反应的还原剂(如
DTT
、巯基乙醇)相溶,但是对去污剂依然是敏感的,其最主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大,无可比性...
科研战神·王
2024-05-21 03:30
生物科学
终极攻略|WB内参的选择
Bradford法敏感度最高,且与一些列干扰Lowry、BCA反应的还原剂(如
DTT
、巯基乙醇)相溶,但是对去污剂依然是敏感的,其最主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大,无可比性...
科研战神·王
2024-05-07 02:03
高分子
DTT
还原
请问为什么
DTT
大多与PBS配合使用,是在碱性条件下利于
DTT
断裂二硫键吗
千韧千迪
2024-03-26 07:34
分子生物
蛋白提取纯化
出现这样的情况,主要是缓冲液中
DTT
的影响,
DTT
会对镍柱的颜色和纯化效率有很大的影响,在碱性的缓冲液条件下镍离子会被
DTT
还原生成棕色的沉淀,所以所有镍柱的生产商都强调要尽量避免
DTT
的...
MDL医学实验
2024-02-19 02:12
生物科学
蛋白/抗体荧光标记使用指南及原理解答-MedChemExpress
需要注意的是,马来酰亚胺酯是一种非活化染料,使用带有马来酰亚胺酯的荧光探针时,需用
DTT
活化后方可进行后续标记[4]。图4.马来酰亚胺化学偶联到巯基的反应图式。(R)表示具有马来酰亚胺...
18317190548
2024-02-18 06:40
生物科学
RNA的分离与纯化
另外,在变性液中加入β-巯基乙醇、二硫苏糖醇(dithiothreitol,
DTT
)等还原剂可以破坏RNase中的二硫键,有利于RNase的变性、水解与灭活。二、总RNA的分离与纯化由于RNase的影响,为获得...
Sh毕合生物
2024-02-06 07:27
分析
求助各位大神,请问如何去除酶存储溶液中的
DTT
求助各位大神,请问如何去除酶存储溶液中的
DTT
柠檬树94
2023-12-30 10:17
有机交流
DTT
二硫代苏硫糖为什么有两个CAS号?分别是27565-41-9,3483-12-...
DTT
二硫代苏硫糖为什么有两个CAS号?分别是27565-41-9,3483-12-3
YOUng6
2023-12-27 01:31
微生物
蛋白变性液蛋白含量不稳
包涵体洗涤变性后,在加入
DTT
后始终不澄清,蛋白含量第一次检测很低,过一个星期复测后含量又很高,这是什么原因?希望有老大能解惑一下
小C:O
2023-12-21 04:00
分子生物
RNA反转录
五、主要反应组分除了反转录酶和引物之外,其它主要反应组分还包括RNA模板(预处理以去除基因组DNA)、缓冲液、dNTP、
DTT
、RNA酶抑制剂和RNase-free水。?RNA模板按本文前述方法制备。表4...
科研小努力
2023-11-21 03:52
生物科学
干货分享|RNA反转录
如果
DTT
或其他添加剂发生沉淀,会降低反应效率;因此,应溶解反应组分并充分混匀。?RNA酶抑制剂通常包含在反应缓冲液中或单独被添加到反转录反应中,用于防止RNA降解。RNase可能在RNA分离...
李英华001
2023-10-19 01:34
休闲灌水
冻干技术
4、容易被氧化的蛋白:可以试一下
DTT
和维生素C的使用。5、为防止长菌(防腐):可以使用一定浓度的庆大霉素,或者是叠氮钠、硫柳汞。6、如果蛋白储存一定时间容易降解,可以适当加一些蛋白...
1429524838
2023-10-07 05:10
生物科学
蛋白提取纯化常见问题?
出现这样的情况,主要是缓冲液中
DTT
的影响,
DTT
会对镍柱的颜色和纯化效率有很大的影响,在碱性的缓冲液条件下镍离子会被
DTT
还原生成棕色的沉淀,所以所有镍柱的生产商都强调要尽量避免
DTT
的...
科研小努力
2023-09-25 02:19
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