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分类	共搜索到 505 个相关话题(最多显示前5000个)	作者	最后发表

分子生物	【经验分享】体外转录踩坑无数，挖到一款好用的国产 T7 RNA 聚合... 很多牌子只卖酶，配套缓冲液不全，DTT、亚精胺都要自己配，配错一点浓度直接转录不出条带。这款国产酶我们先入的5000U小包装试水，后来直接换成25000U大包装批量用，简单说下基础参数，都是...	生物民工wws	2026-08-05 05:57
分子生物	SUMO 标签蛋白切不干净、低温无活性？实测一款适配难溶蛋白的 ... 很多课题组为了匹配SUMO酶，要单独配置含DTT、去垢剂的缓冲液，这款直接配套现货缓冲，收到就能直接做酶切，减少试剂配制带来的误差。2.酶用量低，节约实验成本。常规5μg融合蛋白仅需0.1μ...	生物民工wws	2026-07-30 01:09
分子生物	【交流】做体外转录总卡在产量和纯度？分享一款实验室长期在用的... 加上不少产品只单独卖酶，镁离子、亚精胺、DTT都要自己单独配，每次开实验前光是准备缓冲液就要耗很久。我们实验室经常需要制备毫克级RNA做结构和体外功能实验，前后对比筛选后，现在一直...	生物民工wws	2026-07-30 01:13
精细化工	3-巯基丙酸(CAS 107-96-0)：医药合成与高分子材料中的多功能硫醇... 如已氧化，可通过加入少量还原剂（如DTT或TCEP）还原回收。Q2：3-巯基丙酸和巯基乙酸有什么区别？3-巯基丙酸比巯基乙酸多一个亚甲基（-CH2-），巯基与羧基之间的距离更长。这影响了它们在配...	前衍化学网	2026-07-13 06:07
生物科学	细胞实验小白必看！手把手完整教学质粒转染，步骤清晰不踩雷 10μL5×SDS上样缓冲液：还原性样品（检测二硫键依赖的蛋白）：加含DTT的缓冲液（DTT+）。非还原性样品（检测多聚体/天然构象）：加不含DTT的缓冲液（DTT?）。若样品量有限，可按20μL...	科研战神来了	2026-06-29 01:36
生物科学	不做蛋白定量，凭感觉上样=搞玄学但如果你提蛋白时，用的裂解液或试剂盒或提取方法需要加入DTTβ-巯基乙醇来辅助提取的话，就可能不适合用BCA，因为这些还原剂会被当成蛋白，将Cu??还原为Cu?，最后显色时让读数偏高。...	毕合生物2024	2026-06-24 07:47
生物科学	GST-pulldown 杂带多、无结合？根源与解决方法汇总 30?L的1×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（ProteinLoadingBuffer，含DTT或β-巯基乙醇）。使用金属浴或水浴锅，98℃高温变性煮样10分钟，使结合的蛋白复合物从珠子上解离并变性。离心取上清：煮样...	科研战神来了	2026-06-22 01:52
生物科学	内切酶活性下降与失效的原因及解决方法缓冲液组成要点：Tris-HCl提供适宜pH环境(通常pH7.5-8.0)MgCl?提供必要的Mg??离子(通常5-10mM)KCl或NaCl维持适当离子强度(通常50-100mM)DTT或β-巯基乙醇维持还原环境BSA稳定酶分子，...	毕合生物2024	2026-05-12 05:45
生物科学	为什么蛋白电泳的时候会出现双条带呢？另一方面，样本制备时未加入足量还原剂（如β-巯基乙醇、DTT），无法破坏蛋白的二硫键，导致蛋白形成二聚体、多聚体，这些聚合体的分子量与单体不同，就会出现双条带（如果是产生二聚体的话...	科研战神来了	2026-04-14 01:53
生物科学	生物试剂的保鲜秘籍&129514;延长使用寿命的小技巧? 对于那些吸湿性强的试剂（如DTT、琼脂糖粉末等），我会：?加入小包干燥剂到试剂瓶中（注意不要直接接触试剂）?使用密封性好的塑料容器二次保存?存放在有温控的干燥环境中，避免冰箱取出...	毕合生物2024	2026-02-24 06:38
生物科学	蛋白质提取的基础：裂解液的核心作用与重要性如NaCl，调节离子强度，帮助蛋白质溶解并抑制非特异性相互作用，就像调节"社交距离"的规则其他添加剂：如EDTA（螯合金属离子）、甘油（稳定蛋白质）、DTT（打断二硫键）等，都有其特定的...	毕合生物2024	2026-01-21 07:55
生物科学	WB实验避坑指南：系统性防控蛋白降解，让条带清晰可重复还原剂：添加DTT（终浓度50mM）或β-巯基乙醇（终浓度5%），防止蛋白二硫键形成导致的聚集与降解；螯合剂：EDTA（终浓度2mM）可螯合金属离子，抑制金属依赖性蛋白酶活性。三、操作条件控制...	基础科研平台	2025-12-04 01:39
生物科学	导致蛋白质沉淀/聚集的关键因素还有氧化还原环境变化一个含有多个半胱氨酸的转录因子，我没有及时加入DTT，让它暴露在空气中过夜，第二天发现形成了大量二硫键交联的聚合物。生物因素：蛋白自身的"性格"问题有些蛋白天生...	毕合生物2024	2025-10-24 10:11
生物科学	蛋白纯化大作战！添加剂选对，效率翻倍还原剂：拆二硫键的“工具人”，别忘了后续处理还原剂比如DTT、β-巯基乙醇，专管蛋白的“二硫键麻烦”。二硫键是把双刃剑：能帮蛋白稳住结构，但有时候会让蛋白片段互相缠绕，影响纯化——...	毕合生物2024	2025-09-11 07:43
休闲灌水	EMSA检测实验步骤 EDTA、DTT、甘油、BSA等，pH通常7.5-8.0）、聚丙烯酰胺凝胶（依据核酸片段大小选择合适浓度，一般4-10%）、电泳缓冲液（如0.5×TBE）、上样缓冲液（含甘油、溴酚蓝等）、脱色液（乙醇:乙酸:...	乐奥贝（实验外	2025-06-27 02:51
文献求助	求CNKI期刊论文一篇 96...	zhanglinso	2025-03-26 01:07
生物科学	Caspase-2活性分析试剂盒（比色法）实验操作步骤 WorkingReactionBuffer(1×):使用前，用去离子水稀释到ReactionBuffer(1×)，再加入DTT（最终浓度：每1mLReactionBuffer(1×)加10?LDTT（100×）），置于冰上；4℃保存。Ac-VDQQD-pNA(4mM)...	Abbkine亚科因	2025-01-23 07:20
分析	巯基氨基酸分析我的分析体系只能在水碱性体系，尝试金纳米富集，但无法脱去（DTT试了，但不太行），正在尝试Cu离子富集。如果有大佬知道有什么高含量样品就更好了。万分感谢救救毕业焦虑的孩子吧	顾辛烈ahh	2024-12-26 02:40
生物科学	干货分享｜RNA m6A甲基化修饰和特定基因m6A位点的检测方法 FTO用于将m6A氧化为中间产物hm6A，hm6A进一步与二硫苏糖醇（DTT）转化为稳定的N6-二硫代硫醇甲基腺苷（dm6A）。然后用生物素标记dm6A以富集含有原始m6A的RNA片段。对富集的RNA进行测序以...	chance℃	2024-08-07 03:59
医学	科研干货｜13种蛋白提取方法，赶快收藏手慢无！ BufferA的配制:终浓度母液配40Ml(10ml)溶液所需的量HepesPH7.910mM1M400uL(100ul)MgCl21.5mM2M30uL(7.5ul)KCl10mM250mM1.6mL(400ul)DTT0.5mM0.1M200uL(50ul)剩余体积用ddH2O补足至要求体积!...	科研虫子小助手	2024-07-17 02:10
医学	科研干货｜13种蛋白提取方法，赶快收藏手慢无！ BufferA的配制:终浓度母液配40Ml(10ml)溶液所需的量HepesPH7.910mM1M400uL(100ul)MgCl21.5mM2M30uL(7.5ul)KCl10mM250mM1.6mL(400ul)DTT0.5mM0.1M200uL(50ul)剩余体积用ddH2O补足至要求体积!...	科研虫子小助手	2024-07-12 03:42
生物材料	降冰片烯与DTT紫外交联反应求助！换了两种引发剂都不成胶，这个反应对ph有要求吗，谢谢	8点88	2024-06-06 02:25
分子生物	干货分享\|蛋白定量的3种常用方法 Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，如：K?、Na?、Mg??离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、EDTA、DTT、TCEP和β-巯基乙醇等。但需要注意的是：由于高浓度洗涤...	科研顾问_Gu	2024-06-03 07:46
分子生物	终极攻略\|WB内参的选择 Bradford法敏感度最高，且与一些列干扰Lowry、BCA反应的还原剂（如DTT、巯基乙醇）相溶，但是对去污剂依然是敏感的，其最主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大，无可比性...	科研战神·王	2024-05-21 03:30
生物科学	终极攻略\|WB内参的选择 Bradford法敏感度最高，且与一些列干扰Lowry、BCA反应的还原剂（如DTT、巯基乙醇）相溶，但是对去污剂依然是敏感的，其最主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大，无可比性...	科研战神·王	2024-05-07 02:03