小木虫论坛-学术科研互动平台

版块导航: 正在加载中...

登录注册

显示全部

分类	共搜索到 511 个相关话题(最多显示前5000个)	作者	最后发表

生物科学	Western Blot实验样本制备攻略（附件有图）注意：样品中若有高浓度还原剂（比如DTT）或螯合剂（EDTA），会干扰BCA法，可以用Bradford法（考马斯亮蓝法）代替样品最好做2-3个稀释度，取在标准曲线中间段的浓度定量后，所有样品用裂解...	晶莱生物	2026-10-26 07:56
生物科学	WB实验避坑指南｜6类常见试剂毒性及防护方法全攻略！还原剂——DTT/β-巯基乙醇（刺激性+毒性）DTT（二硫苏糖醇）和β-巯基乙醇是WB样本处理中常用的还原剂，主要作用是打破蛋白二硫键，使蛋白完全变性，两者均具有刺激性和一定毒性，β-巯基...	晶莱生物	2026-10-13 07:24
生物科学	【实验答疑室】同样10μL上样，为什么你的WB数据总在“飘”？... 但如果裂解液中含有DTT或β-巯基乙醇，它们会“冒充”蛋白质去还原Cu??，导致读数虚高。后果很直接：你以为取够了10μg，实际上可能只取了6μg。每条泳道的真实蛋白量不一致，内参自然不...	科研战神来了	2026-10-10 02:36
新药研发	pHAb反应性染料：抗体内吞研究的智能pH传感工具当抗体铰链区的半胱氨酸二硫键通过还原剂（如DTT或TCEP）还原成巯基后，马来酰亚胺基团即与抗体结合。在偶联工作流程方面，pHAb反应性染料可通过两种不同的方式与抗体进行偶联。第一种是...	优爱蛋白	2026-09-17 01:17
分子生物	【产品测评分享】体外转录产量不理想、dsRNA 副产物高？... 产品套装配套完整10×T7转录缓冲液以及DTT缓冲液，无需自行配制复杂组分，直接搭建20μL标准反应体系，37℃孵育1?2小时即可完成转录，新手也可以快速上手。结合大量客户反馈，分享两个高频...	生物民工wws	2026-08-18 08:22
分子生物	体外转录/PCR 总提不上产量？终于找到稳定好用的无机焦磷酸酶 2.耐冻融，长期保存稳定省心储存缓冲液配比优化过，含甘油、DTT、EDTA多重保护，多次反复冻融活性损耗很小，不用每次都分装成小份；20℃避光储存能放满一整年，长期做批量实验很省事。3.高...	生物民工wws	2026-08-11 01:49
生物科学	原核表达怎么做？大肠杆菌 His 融合蛋白纯化实操攻略 DTT还可防止含半胱氨酸的蛋白氧化聚集。7.离心去除细胞碎片破碎后立即于12,000×g，4℃离心15min。小心吸取上清液（含可溶性His融合蛋白），转移至新离心管中，避免吸入底部沉淀。取样...	科研战神来了	2026-08-10 01:12
分子生物	【经验分享】体外转录踩坑无数，挖到一款好用的国产 T7 RNA 聚合... 很多牌子只卖酶，配套缓冲液不全，DTT、亚精胺都要自己配，配错一点浓度直接转录不出条带。这款国产酶我们先入的5000U小包装试水，后来直接换成25000U大包装批量用，简单说下基础参数，都是...	生物民工wws	2026-08-05 05:57
分子生物	SUMO 标签蛋白切不干净、低温无活性？实测一款适配难溶蛋白的 ... 很多课题组为了匹配SUMO酶，要单独配置含DTT、去垢剂的缓冲液，这款直接配套现货缓冲，收到就能直接做酶切，减少试剂配制带来的误差。2.酶用量低，节约实验成本。常规5μg融合蛋白仅需0.1μ...	生物民工wws	2026-07-30 01:09
分子生物	【交流】做体外转录总卡在产量和纯度？分享一款实验室长期在用的... 加上不少产品只单独卖酶，镁离子、亚精胺、DTT都要自己单独配，每次开实验前光是准备缓冲液就要耗很久。我们实验室经常需要制备毫克级RNA做结构和体外功能实验，前后对比筛选后，现在一直...	生物民工wws	2026-07-30 01:13
精细化工	3-巯基丙酸(CAS 107-96-0)：医药合成与高分子材料中的多功能硫醇... 如已氧化，可通过加入少量还原剂（如DTT或TCEP）还原回收。Q2：3-巯基丙酸和巯基乙酸有什么区别？3-巯基丙酸比巯基乙酸多一个亚甲基（-CH2-），巯基与羧基之间的距离更长。这影响了它们在配...	前衍化学网	2026-07-13 06:07
生物科学	细胞实验小白必看！手把手完整教学质粒转染，步骤清晰不踩雷 10μL5×SDS上样缓冲液：还原性样品（检测二硫键依赖的蛋白）：加含DTT的缓冲液（DTT+）。非还原性样品（检测多聚体/天然构象）：加不含DTT的缓冲液（DTT?）。若样品量有限，可按20μL...	科研战神来了	2026-06-29 01:36
生物科学	不做蛋白定量，凭感觉上样=搞玄学但如果你提蛋白时，用的裂解液或试剂盒或提取方法需要加入DTTβ-巯基乙醇来辅助提取的话，就可能不适合用BCA，因为这些还原剂会被当成蛋白，将Cu??还原为Cu?，最后显色时让读数偏高。...	毕合生物2024	2026-06-24 07:47
生物科学	GST-pulldown 杂带多、无结合？根源与解决方法汇总 30?L的1×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（ProteinLoadingBuffer，含DTT或β-巯基乙醇）。使用金属浴或水浴锅，98℃高温变性煮样10分钟，使结合的蛋白复合物从珠子上解离并变性。离心取上清：煮样...	科研战神来了	2026-06-22 01:52
生物科学	内切酶活性下降与失效的原因及解决方法缓冲液组成要点：Tris-HCl提供适宜pH环境(通常pH7.5-8.0)MgCl?提供必要的Mg??离子(通常5-10mM)KCl或NaCl维持适当离子强度(通常50-100mM)DTT或β-巯基乙醇维持还原环境BSA稳定酶分子，...	毕合生物2024	2026-05-12 05:45
生物科学	为什么蛋白电泳的时候会出现双条带呢？另一方面，样本制备时未加入足量还原剂（如β-巯基乙醇、DTT），无法破坏蛋白的二硫键，导致蛋白形成二聚体、多聚体，这些聚合体的分子量与单体不同，就会出现双条带（如果是产生二聚体的话...	科研战神来了	2026-04-14 01:53
生物科学	生物试剂的保鲜秘籍&129514;延长使用寿命的小技巧? 对于那些吸湿性强的试剂（如DTT、琼脂糖粉末等），我会：?加入小包干燥剂到试剂瓶中（注意不要直接接触试剂）?使用密封性好的塑料容器二次保存?存放在有温控的干燥环境中，避免冰箱取出...	毕合生物2024	2026-02-24 06:38
生物科学	蛋白质提取的基础：裂解液的核心作用与重要性如NaCl，调节离子强度，帮助蛋白质溶解并抑制非特异性相互作用，就像调节"社交距离"的规则其他添加剂：如EDTA（螯合金属离子）、甘油（稳定蛋白质）、DTT（打断二硫键）等，都有其特定的...	毕合生物2024	2026-01-21 07:55
生物科学	WB实验避坑指南：系统性防控蛋白降解，让条带清晰可重复还原剂：添加DTT（终浓度50mM）或β-巯基乙醇（终浓度5%），防止蛋白二硫键形成导致的聚集与降解；螯合剂：EDTA（终浓度2mM）可螯合金属离子，抑制金属依赖性蛋白酶活性。三、操作条件控制...	基础科研平台	2025-12-04 01:39
生物科学	导致蛋白质沉淀/聚集的关键因素还有氧化还原环境变化一个含有多个半胱氨酸的转录因子，我没有及时加入DTT，让它暴露在空气中过夜，第二天发现形成了大量二硫键交联的聚合物。生物因素：蛋白自身的"性格"问题有些蛋白天生...	毕合生物2024	2025-10-24 10:11
生物科学	蛋白纯化大作战！添加剂选对，效率翻倍还原剂：拆二硫键的“工具人”，别忘了后续处理还原剂比如DTT、β-巯基乙醇，专管蛋白的“二硫键麻烦”。二硫键是把双刃剑：能帮蛋白稳住结构，但有时候会让蛋白片段互相缠绕，影响纯化——...	毕合生物2024	2025-09-11 07:43
休闲灌水	EMSA检测实验步骤 EDTA、DTT、甘油、BSA等，pH通常7.5-8.0）、聚丙烯酰胺凝胶（依据核酸片段大小选择合适浓度，一般4-10%）、电泳缓冲液（如0.5×TBE）、上样缓冲液（含甘油、溴酚蓝等）、脱色液（乙醇:乙酸:...	乐奥贝（实验外	2025-06-27 02:51
文献求助	求CNKI期刊论文一篇 96...	zhanglinso	2025-03-26 01:07
生物科学	Caspase-2活性分析试剂盒（比色法）实验操作步骤 WorkingReactionBuffer(1×):使用前，用去离子水稀释到ReactionBuffer(1×)，再加入DTT（最终浓度：每1mLReactionBuffer(1×)加10?LDTT（100×）），置于冰上；4℃保存。Ac-VDQQD-pNA(4mM)...	Abbkine亚科因	2025-01-23 07:20
分析	巯基氨基酸分析我的分析体系只能在水碱性体系，尝试金纳米富集，但无法脱去（DTT试了，但不太行），正在尝试Cu离子富集。如果有大佬知道有什么高含量样品就更好了。万分感谢救救毕业焦虑的孩子吧	顾辛烈ahh	2024-12-26 02:40