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分类	共搜索到 341 个相关话题(最多显示前5000个)	作者	最后发表

虫友互识	2025年无人驾驶、飞行器控制与航天技术国际会议 '...	xyxyz0324	2025-12-14 10:40
生物科学	膜蛋白实验三连杀：表达→提取→纯化一次通关！别死磕BL21，直接换C41(DE3)，它的lacUV5启动子自带“减速buff”，表达慢半拍，菌活下来了，蛋白才有机会高产！培养基别用富得流油的TB，换成“穷酸”M9，细胞吃糠咽粮，折叠反而更规矩，...	毕合生物2024	2025-07-17 02:04
生物科学	α-银环蛇毒素的合成与表达、相关研究案例也有研究设计并人工合成引物，对重组质粒pMD-α-BGT进行PCR扩增获得α-BGT基因，构建融合基因表达载体pGEX-α-BGT，转化大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达，表达产物经分析在约34ku处可见...	丰度Bio君	2025-06-19 06:49
绿色求助(高悬赏)	Metabolic Engineering of Escherichia coli BL21(DE3)for 2′-... MetabolicEngineeringofEscherichiacoliBL21(DE3)for2′-FucosyllactoseSynthesisinaHigherProductivityNLi,SYan,HXia,YFang,KNiu,GLi,ZXuMetabolicEngineeringofEscherichiacoliBL21(DE3)...	0JOKER0	2025-02-08 04:03
分子生物	大肠双质粒发酵OD相差较大求助,大肠杆菌发酵时，转化了两株菌，一种是PACYCDuet质粒转化到BL21(DE3)，另外一种是PACYCDuet和PET28A双质粒共转到BL21(DE3）中，加入诱导剂后两株菌OD相差特别大，问下各位大佬是什么...	YYIN111	2024-12-03 07:46
医学	原核蛋白表达的整体实验流程和具体实验结果 2构建正确的Pet24a-序列二表达载体在大肠杆菌中的表达2.1转化至大肠杆菌BL21(DE3)常规CaCl2法。2.2IPTG诱导融合蛋白的表达2.2.1挑取转化平板上的单克隆接种于含50μg/mlKan的3mlLB培养液的...	超困困狗g	2024-05-06 06:00
分子生物	小鼠组织提RNA电泳验证的结果有什么问题上面为什么有杂带啊跑... 'm.weishi.qq....	噶赡合	2024-03-27 01:20
文献求助	CRISPR-Based Construction of a BL21(DE3)-Derived Variant ... CRISPR-BasedConstructionofaBL21(DE3)-DerivedVariantStrainLibrarytoRapidlyImproveRecombinantProteinProductionLi,Zi-Jia，Zhang,Zi-Xu，Xu,Yan，Shi,Tian-Qiong，Ye,Chao，Sun,Xiao-...	麦克呵呵	2024-03-19 11:04
分子生物	原核表达诱导不出来，6月份还能诱导出来，同样的条件现在诱导不... 最近尝试表达纯化真菌的几丁质酶和丝氨酸蛋白酶（1200bp），使用pet28a作为载体、转到bl21(de3)里。6月底和师姐一起连接转化时表达出来蛋白，7月份用碧云天his标签纯化试剂盒没纯化出来。9...	出被窝	2023-11-02 04:13
生物科学	手把手教你做“蛋白纯化” 2、将构建成功的质粒转化到BL21（DE3）中，37℃培养过夜，挑单克隆小摇过夜；3、小诱导摸索最佳诱导条件：将摇过夜的菌液1:1000接种到3mLLB中，37℃摇4-5h至菌液OD600=0.6-0.8，加入不同...	科研小努力	2023-08-23 05:07
分子生物	原核蛋白表达的整体实验流程和具体实验结果 2构建正确的Pet24a-序列二表达载体在大肠杆菌中的表达2.1转化至大肠杆菌BL21(DE3)常规CaCl2法。2.2IPTG诱导融合蛋白的表达2.2.1挑取转化平板上的单克隆接种于含50μg/mlKan的3mlLB培养液的...	百事可爱66	2023-08-15 08:14
生物科学	蛋白纯化的步骤 2、将构建成功的质粒转化到BL21（DE3）中，37℃培养过夜，挑单克隆小摇过夜；3、小诱导摸索最佳诱导条件：将摇过夜的菌液1:1000接种到3mLLB中，37℃摇4-5h至菌液OD600=0.6-0.8，加入不同...	科研小努力	2023-08-15 05:23
生物科学	原核蛋白表达的整体实验流程和具体实验结果 2构建正确的Pet24a-序列二表达载体在大肠杆菌中的表达2.1转化至大肠杆菌BL21(DE3)常规CaCl2法。2.2IPTG诱导融合蛋白的表达2.2.1挑取转化平板上的单克隆接种于含50μg/mlKan的3mlLB培养液的...	科研小努力	2023-08-09 03:02
文献求助	谷氨酸脱羧酶在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达及固定化酶法生产γ-... 谷氨酸脱羧酶在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达及固定化酶法生产γ-氨基丁酸闫红梅谷氨酸脱羧酶在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达及固定化酶法生产γ-氨基丁酸山东大学2017111	麦克呵呵	2023-07-27 12:21
硕博家园	GST纯化目的蛋白降解与有杂带表达载体pgex-6p-1,表达株大肠bl21(de3),诱导条件：16℃、0.5mmiptg、220rpm,收菌高压破碎至溶液清亮(破菌液中加1mmdtt、1mmpmsf），上清与2mlgst树脂4℃旋转结合4小时后，洗杂后用100upp酶...	圆圈爱圈圆	2023-04-28 08:50
分子生物	GST纯化目的蛋白降解与有杂带表达载体pgex-6p-1,表达株大肠bl21(de3),诱导条件：16℃、0.5mmiptg、220rpm,收菌高压破碎至溶液清亮(破菌液中加1mmdtt、1mmpmsf），上清与2mlgst树脂4℃旋转结合4小时后，洗杂后用100upp酶...	圆圈爱圈圆	2023-04-28 08:37
有机交流	蝎毒活性肽 BmK AngM1 的定点突变及其抗炎活性研究 Cao等[16]利用pET32a载体构建了重组表达载体,并在E.coliBL21trxB(DE3)宿主菌中进行表达,发现在BL21trxB(DE3)中能够有效表达出具有活性的BmKAngM1。因此,本文通过IMPACTTM-TWIN系统,在宿主菌...	专注多肽	2023-02-16 06:01
分子生物	His标签重组蛋白的检测结果难以解释在BL21(DE3)中诱导表达，菌体总蛋白中WB能检测到目的蛋白与预期相符，而用6×HIS-Tag抗体去检测，出现的条带在55KD。其他地方没有条带。问题出在哪里？是抗体质量的问题吗？	反对派	2022-09-10 02:52
硕博家园	请做过硒代培养大肠工程菌株表达蛋白质的大神帮我看看为啥我的硒... 我的步骤是这样的：1、先把之前转BL21（DE3）的质粒转到甲硫氨酸缺陷菌株里面2、用添加4%葡萄糖的LB，小摇（3ml），到OD1左右，感觉上不去3、用2步的条件中摇，OD1可能不到1，摇5小时感觉...	清晨带雨行	2022-06-15 06:09
分子生物	蛋白表达BL21(DE3)转接后摇不起来，sds-page无天然蛋白条带菌液中像沙石状沉淀，然后直接煮沸跑sds-page什么条带都没有，一片空白的，我这个目的蛋白是一种蛋白酶，文献中有表达过，也是用的bl21（de3），应该不是有毒蛋白的问题吧	蚝油生菜	2022-06-08 12:34
分子生物	bl21de3表达pet28a16摄氏度还是在沉淀里偏多依次:M10h15h20h25h35h的上、清16摄氏度rpm90iptg0.1mM已经是低温低iptg低转速了还是基本表达在沉淀里我要的是可溶性表达有大佬给点建议吗感谢！困扰太久了谢谢各位链接:'...	UNFOLLOW	2022-04-29 02:27
分子生物	蛋白表达 SDS-PAGE只有两三条非常浅的条带做的是一种蛋白酶的原核表达，表达载体为pet28a，宿主细胞为bl21（de3）。摇菌至od=0.6左右时加入浓度为0.8mm的iptg，37℃诱导4h，超声破碎至澄清离心取上清液加buffer，100℃煮沸5min，...	蚝油生菜	2022-04-22 02:15
分子生物	大肠杆菌表达载体拷贝数问题目前的宿主是BL21（DE3）.2.如果不需要换表达载体和宿主，可以直接用新的ORI碱基序列替换掉原先的ORI序列吗？3.载体上的ORI具体是哪一段可以用什么软件分析出来呢？万分感谢！	稻草人2011	2022-03-28 03:20
文献求助	一个外文文献 HWang，XLi，YMa，JSongProcessoptimizationofhigh-levelextracellularproductionofalkalinepectatelyaseinrecombinantEscherichiacoliBL21(DE3)...10.1016/j.bej.2014.08.020...DE3	franklinlzb	2021-12-02 01:25
分子生物	寻求E.coli BL21(DE3)的全基因组序列下载方式，链接，谢谢各位... 请问谁有E.coliBL21(DE3)的全基因组序列？在哪里可以下载到？为什么NCBI上查不到，要详细的，谢谢各位大侠！	103007054025	2021-11-19 08:43