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分类	共搜索到 349 个相关话题(最多显示前5000个)	作者	最后发表

微生物	BL21（DE3）出现粗长丝状物种子构建时发现有丝状物，长度是正常大肠杆菌的好几十倍，显微镜下持续观察发现这些是正常大肠杆菌形态转变的。接种到发酵罐会2-4小时变的更长、更粗。大家可有遇到过这样的情况，欢迎交流	wanghu9125	2026-09-06 03:37
生物科学	原核表达怎么做？大肠杆菌 His 融合蛋白纯化实操攻略本文系统整理了大肠杆菌表达系统（BL21(DE3)）中His标签重组蛋白的诱导表达与镍柱亲和层析纯化方案，涵盖菌株转化、逐级放大培养、IPTG诱导、超声破碎及Ni柱梯度洗脱等核心步骤，并补充诸多...	科研战神来了	2026-08-10 01:12
生物科学	蛋白纯化踩坑避雷｜GST 标签柱层析&Beads 实操经验本文基于实验室成熟方案，涵盖从菌种复苏到GST柱层析（预装柱与磁珠两种方式）的全流程，并补充关键操作细节与注意事项，适用于BL21(DE3)/pGEX系统表达的重组蛋白纯化。一、目的蛋白的大量...	科研战神来了	2026-08-06 02:34
硕博家园	蛋白表达情况异常我在pET28a载体上插入一个双组分蛋白的基因B和A，此时B基因在BL21（DE3）中主要表达，A基因基本不表达。于是选择在A基金前添加一个Ptac启动子，此时A基因主要表达且可溶，B基因微量表达且可...	dkaif	2026-05-01 10:09
微生物	BL21(DE3)UV或者丝裂霉素诱导条件下会释放DE3的噬菌体吗？ BL21(DE3)之类的DE3菌株溶源化了DE3，理论上这个DE3是缺陷型的。想确认下，这类DE3的菌株如果按照常规溶源化的菌株进行UV或者丝裂霉素诱导其会发生裂解释放DE3噬菌体吗？如果释放的化，这个...	yuanfeng	2026-04-20 07:19
分子生物	Crispr求助大肠杆菌BL21（DE3）菌株cas9质粒成功转入后，电转携带sgRNA的质粒以及敲除基因的供体片段到阿拉伯糖诱导之后的菌里，涂双抗平板一直不长菌，电转之后涂kan平板长菌，pcas质粒是在的。...	xixi-_-	2026-04-18 03:51
微生物	异源表达 pet-28a空载体转化到bl21（DE3）中会产生有活性的β半乳糖苷酶吗？我看文献中都是用的这个体系去表达自己的外源β半乳糖苷酶基因的，但是我试了一下我师妹的pet-28a载体含木聚糖酶基因转化...	无学论hh	2026-04-13 10:39
硕博家园	博一被送出联培感觉不适应怎么办然后我把pET28a换到BL21(DE3),又把自诱导换成IPTG诱导，这才有了表达。这浪费了很多时间，感觉他们不是很上心，但又一直催我。现在的状态就是早上9点钟多10分来，晚上出去一看都1点半了，...	全村的狗	2026-03-31 03:38
虫友互识	2025年无人驾驶、飞行器控制与航天技术国际会议 '...	xyxyz0324	2025-12-14 10:40
生物科学	膜蛋白实验三连杀：表达→提取→纯化一次通关！别死磕BL21，直接换C41(DE3)，它的lacUV5启动子自带“减速buff”，表达慢半拍，菌活下来了，蛋白才有机会高产！培养基别用富得流油的TB，换成“穷酸”M9，细胞吃糠咽粮，折叠反而更规矩，...	毕合生物2024	2025-07-17 02:04
生物科学	α-银环蛇毒素的合成与表达、相关研究案例也有研究设计并人工合成引物，对重组质粒pMD-α-BGT进行PCR扩增获得α-BGT基因，构建融合基因表达载体pGEX-α-BGT，转化大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达，表达产物经分析在约34ku处可见...	丰度Bio君	2025-06-19 06:49
绿色求助(高悬赏)	Metabolic Engineering of Escherichia coli BL21(DE3)for 2′-... MetabolicEngineeringofEscherichiacoliBL21(DE3)for2′-FucosyllactoseSynthesisinaHigherProductivityNLi,SYan,HXia,YFang,KNiu,GLi,ZXuMetabolicEngineeringofEscherichiacoliBL21(DE3)...	0JOKER0	2025-02-08 04:03
分子生物	大肠双质粒发酵OD相差较大求助,大肠杆菌发酵时，转化了两株菌，一种是PACYCDuet质粒转化到BL21(DE3)，另外一种是PACYCDuet和PET28A双质粒共转到BL21(DE3）中，加入诱导剂后两株菌OD相差特别大，问下各位大佬是什么...	YYIN111	2024-12-03 07:46
医学	原核蛋白表达的整体实验流程和具体实验结果 2构建正确的Pet24a-序列二表达载体在大肠杆菌中的表达2.1转化至大肠杆菌BL21(DE3)常规CaCl2法。2.2IPTG诱导融合蛋白的表达2.2.1挑取转化平板上的单克隆接种于含50μg/mlKan的3mlLB培养液的...	超困困狗g	2024-05-06 06:00
分子生物	小鼠组织提RNA电泳验证的结果有什么问题上面为什么有杂带啊跑... 'm.weishi.qq....	噶赡合	2024-03-27 01:20
文献求助	CRISPR-Based Construction of a BL21(DE3)-Derived Variant ... CRISPR-BasedConstructionofaBL21(DE3)-DerivedVariantStrainLibrarytoRapidlyImproveRecombinantProteinProductionLi,Zi-Jia，Zhang,Zi-Xu，Xu,Yan，Shi,Tian-Qiong，Ye,Chao，Sun,Xiao-...	麦克呵呵	2024-03-19 11:04
分子生物	原核表达诱导不出来，6月份还能诱导出来，同样的条件现在诱导不... 最近尝试表达纯化真菌的几丁质酶和丝氨酸蛋白酶（1200bp），使用pet28a作为载体、转到bl21(de3)里。6月底和师姐一起连接转化时表达出来蛋白，7月份用碧云天his标签纯化试剂盒没纯化出来。9...	出被窝	2023-11-02 04:13
生物科学	手把手教你做“蛋白纯化” 2、将构建成功的质粒转化到BL21（DE3）中，37℃培养过夜，挑单克隆小摇过夜；3、小诱导摸索最佳诱导条件：将摇过夜的菌液1:1000接种到3mLLB中，37℃摇4-5h至菌液OD600=0.6-0.8，加入不同...	科研小努力	2023-08-23 05:07
分子生物	原核蛋白表达的整体实验流程和具体实验结果 2构建正确的Pet24a-序列二表达载体在大肠杆菌中的表达2.1转化至大肠杆菌BL21(DE3)常规CaCl2法。2.2IPTG诱导融合蛋白的表达2.2.1挑取转化平板上的单克隆接种于含50μg/mlKan的3mlLB培养液的...	百事可爱66	2023-08-15 08:14
生物科学	蛋白纯化的步骤 2、将构建成功的质粒转化到BL21（DE3）中，37℃培养过夜，挑单克隆小摇过夜；3、小诱导摸索最佳诱导条件：将摇过夜的菌液1:1000接种到3mLLB中，37℃摇4-5h至菌液OD600=0.6-0.8，加入不同...	科研小努力	2023-08-15 05:23
生物科学	原核蛋白表达的整体实验流程和具体实验结果 2构建正确的Pet24a-序列二表达载体在大肠杆菌中的表达2.1转化至大肠杆菌BL21(DE3)常规CaCl2法。2.2IPTG诱导融合蛋白的表达2.2.1挑取转化平板上的单克隆接种于含50μg/mlKan的3mlLB培养液的...	科研小努力	2023-08-09 03:02
文献求助	谷氨酸脱羧酶在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达及固定化酶法生产γ-... 谷氨酸脱羧酶在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达及固定化酶法生产γ-氨基丁酸闫红梅谷氨酸脱羧酶在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达及固定化酶法生产γ-氨基丁酸山东大学2017111	麦克呵呵	2023-07-27 12:21
硕博家园	GST纯化目的蛋白降解与有杂带表达载体pgex-6p-1,表达株大肠bl21(de3),诱导条件：16℃、0.5mmiptg、220rpm,收菌高压破碎至溶液清亮(破菌液中加1mmdtt、1mmpmsf），上清与2mlgst树脂4℃旋转结合4小时后，洗杂后用100upp酶...	圆圈爱圈圆	2023-04-28 08:50
分子生物	GST纯化目的蛋白降解与有杂带表达载体pgex-6p-1,表达株大肠bl21(de3),诱导条件：16℃、0.5mmiptg、220rpm,收菌高压破碎至溶液清亮(破菌液中加1mmdtt、1mmpmsf），上清与2mlgst树脂4℃旋转结合4小时后，洗杂后用100upp酶...	圆圈爱圈圆	2023-04-28 08:37