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Crispr求助
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想问下做细菌crispr/cas9的朋友。大肠杆菌BL21（DE3）菌株cas9质粒成功转入后，电转携带sgRNA的质粒以及敲除基因的供体片段到阿拉伯糖诱导之后的菌里，涂双抗平板一直不长菌，电转之后涂kan平板长菌，pcas质粒是在的。换了sgRNA也还是不长，敲除的两个靶点都是涂双抗平板一直不长菌。然后又敲除一个之前做过的靶点，涂双抗平板也没有之前长得菌多了，只长了几个，验证电转sgRNA空质粒是能转进去的呀，理论上sgRNA脱靶了会导致一点都不长吗？ @biostar2009 @youlinglyw 发自小木虫手机客户端 |
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