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tianyufeiyu

铁虫 (初入文坛)

[求助] DNA电泳,跑的很慢 已有3人参与

我用TBE做缓冲液,制备琼脂糖凝胶。用6×loading Buffer上样,在120V电压下,一个小时还不能跑完。请问有没有虫友知道,这是怎么一回事啊。还请多多指教,谢谢啦!
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小骆驼123.

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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tianyufeiyu: 金币+3 2016-02-19 16:16:01
你的缓冲液是什么浓度的呀,我用的是1乘的,配胶用五乘的,大概30分钟跑完吧,也可能你的样品分子量比较大

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2楼2016-02-18 18:41:04
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tianyufeiyu

铁虫 (初入文坛)

缓冲液我也是用1乘的,不过配胶用的也是1乘的,DNA的分子量在5000多bp

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3楼2016-02-18 23:14:38
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8023xz

铁杆木虫 (文坛精英)

5000多,片段确实有些大。跑过2000多bp,缓冲液1乘,配胶1乘,恒压100V,20分钟左右

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4楼2016-02-19 00:44:16
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20140427

铜虫 (初入文坛)

tbe请用0.5的,5000bp请用0.8的胶

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5楼2016-02-19 00:50:18
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heianduck

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看看你两边铂丝有没有问题
6楼2016-02-19 11:52:04
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tianyufeiyu

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by heianduck at 2016-02-19 11:52:04
看看你两边铂丝有没有问题

谢谢,我看看

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7楼2016-02-19 14:36:09
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tianyufeiyu

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 20140427 at 2016-02-19 00:50:18
tbe请用0.5的,5000bp请用0.8的胶

谢谢,我试试

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8楼2016-02-19 14:36:28
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tianyufeiyu

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 8023xz at 2016-02-19 00:44:16
5000多,片段确实有些大。跑过2000多bp,缓冲液1乘,配胶1乘,恒压100V,20分钟左右

谢谢

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9楼2016-02-19 14:36:44
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sunlk

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
tianyufeiyu: 金币+7 2016-07-07 16:35:27
TBE本身就跑的慢,你可以试试TAE;还有如果电泳液存储液配错了 也会导致很慢
很给力
10楼2016-02-23 08:35:22
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