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790772426

铁虫 (初入文坛)

[求助] 大家帮我分析一下,为什么marker电泳拖尾严重 已有3人参与

本人做过2年的电泳,以前出现过一次类似的问题,结果为marker降解,这次出现的问题找不到原因,在溶胶的过程中是完全没问题的,想请各位帮我看看。我说说下电泳的其他因素:前两个泳道是marker,后面的7个是我的胶回收条带,电泳条件为80V,50分钟,此外还跑过100V和120V的电压,结果marker还是如图拖尾;marker上样量做过1到10微升的梯度,结果marker还是拖尾;换了一管marker和电泳仪电源。结果还是如此;胶浓度分别跑过1%,1.5%,2%,结果还是marker拖尾严重(本图胶浓度为1.5%)
注:
Marker 为康为世纪的DM2000
TAE 为康为世纪的50*TAE,稀释到1*TAE进行电泳。
核酸染料 为Gelred,加量为10%

大家帮我分析一下,为什么marker电泳拖尾严重
电泳图.png
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原海亮

木虫 (著名写手)

染料问题吧,这个gelred对大片段染色是会出现不太清晰拖尾情况,建议可以找个用EB的实验室,跑一次看看

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
2楼2016-01-27 12:08:35
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zjrzj520

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

maker都出现相应的拖尾现象,你可以考虑下是不是的你电泳液有问题,一般电泳液用的时间久了,就会出现这种情况

希望对你有帮助
坚持
7楼2016-02-02 23:44:25
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790772426

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zjrzj520 at 2016-02-02 23:44:25
maker都出现相应的拖尾现象,你可以考虑下是不是的你电泳液有问题,一般电泳液用的时间久了,就会出现这种情况

希望对你有帮助

谢谢了啊,那个电泳液每次都换,而且也试过其他实验室的,都是这个样子
8楼2016-02-14 10:01:05
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790772426

铁虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-01-27 12:08:35
染料问题吧,这个gelred对大片段染色是会出现不太清晰拖尾情况,建议可以找个用EB的实验室,跑一次看看

我之前一直都是用这个染色的,做了2年,跑5000bp的marker都没问题,2000bp的就更没问题了,最近换了一个实验室,我把之前的操作和药品带过来,就出现这样的问题了。我都无语了
3楼2016-01-28 09:25:25
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潜度幻想

新虫 (小有名气)

4楼2016-01-28 09:55:46
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790772426

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 潜度幻想 at 2016-01-28 09:55:46
品牌?

你是说GelRed吗?
5楼2016-02-01 09:13:44
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匿名

用户注销 (初入文坛)

本帖仅楼主可见
6楼2016-02-02 20:09:33
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xiangyingliu

银虫 (小有名气)

可能是电泳仪电压不稳定你跑跑别的样品试试看

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9楼2016-02-14 11:32:30
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fudan671

木虫 (著名写手)

10楼2016-02-14 19:39:30
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