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x小管哈哈

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于多肽合成,请大家帮我分析一下,万分感谢已有3人参与

最近刚刚合成了一条含有56个氨基酸的多肽链,用的是Fmoc固相合成法,树脂是肼树脂,当我接上30个AA之后,为了检验我是否接上了,我取出了少许树脂,用TFA切割液切割,进色谱分析(如图),但是在昨天我把AA全部接完之后再用TFA切完后,沉淀时发现没有产物,我就想就算我后面的AA就算没有接上去我前面接上的30个AA也应该能够切出来啊,为什么最后切出来基本上没有东西呢,求各位帮我分析一下这是什么情况,万分感谢

关于多肽合成,请大家帮我分析一下,万分感谢
这是接完30个AA之后的粗肽分析色谱图.jpg
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hdl098

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是lz最后吐了口唾沫

发自小木虫Android客户端
2楼2015-12-09 10:14:04
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xiaohaizi0220

木虫 (正式写手)

基础研发之沉默

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能原因:1、最后的多肽没有切下来,还在树脂上呢,可以提高TFA的浓度或延长时间再试一试。2、30aa时裂解的实验有问题,这个估计需要在验证一次。
我觉得第一种可能性大一些。个人意见,仅供参考。
有限的我却思考无限的存在
3楼2015-12-11 16:41:21
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shale1983

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaohaizi0220 at 2015-12-11 16:41:21
可能原因:1、最后的多肽没有切下来,还在树脂上呢,可以提高TFA的浓度或延长时间再试一试。2、30aa时裂解的实验有问题,这个估计需要在验证一次。
我觉得第一种可能性大一些。个人意见,仅供参考。

楼主是否考虑过,你的多肽有可能没有沉淀下来!

发自小木虫IOS客户端
4楼2015-12-12 23:13:15
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wangjin1981

金虫 (正式写手)

念念不忘,必有回响

【答案】应助回帖

带着切割液分析一下,出峰则是因为切割液/乙醚(v/v)大了,没沉淀好;没出峰,多肽还在树脂上。
备注:长肽通常切割时间要长0.5-1h,而且其本身的溶解性会比较好;
to be or not to be
5楼2015-12-14 10:25:46
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