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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 关于多肽合成，请大家帮我分析一下，万分感谢
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x小管哈哈

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于多肽合成，请大家帮我分析一下，万分感谢 已有3人参与

最近刚刚合成了一条含有56个氨基酸的多肽链，用的是Fmoc固相合成法，树脂是肼树脂，当我接上30个AA之后，为了检验我是否接上了，我取出了少许树脂，用TFA切割液切割，进色谱分析（如图），但是在昨天我把AA全部接完之后再用TFA切完后，沉淀时发现没有产物，我就想就算我后面的AA就算没有接上去我前面接上的30个AA也应该能够切出来啊，为什么最后切出来基本上没有东西呢，求各位帮我分析一下这是什么情况，万分感谢

关于多肽合成，请大家帮我分析一下，万分感谢
这是接完30个AA之后的粗肽分析色谱图.jpg
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1楼 2015-12-09 09:49:34
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xiaohaizi0220

木虫 (正式写手)

基础研发之沉默

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能原因：1、最后的多肽没有切下来，还在树脂上呢，可以提高TFA的浓度或延长时间再试一试。2、30aa时裂解的实验有问题，这个估计需要在验证一次。
我觉得第一种可能性大一些。个人意见，仅供参考。
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有限的我却思考无限的存在
3楼2015-12-11 16:41:21
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hdl098

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是lz最后吐了口唾沫

发自小木虫Android客户端
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2楼2015-12-09 10:14:04
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shale1983

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaohaizi0220 at 2015-12-11 16:41:21
可能原因：1、最后的多肽没有切下来，还在树脂上呢，可以提高TFA的浓度或延长时间再试一试。2、30aa时裂解的实验有问题，这个估计需要在验证一次。
我觉得第一种可能性大一些。个人意见，仅供参考。

楼主是否考虑过，你的多肽有可能没有沉淀下来！

发自小木虫IOS客户端
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4楼2015-12-12 23:13:15
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wangjin1981

金虫 (正式写手)

念念不忘，必有回响

【答案】应助回帖

带着切割液分析一下，出峰则是因为切割液/乙醚（v/v）大了，没沉淀好；没出峰，多肽还在树脂上。
备注：长肽通常切割时间要长0.5-1h,而且其本身的溶解性会比较好；
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to be or not to be
5楼2015-12-14 10:25:46
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