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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 设计SYBR荧光引物
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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吕木木

新虫 (小有名气)

[交流] 设计SYBR荧光引物

跑荧光跑了一个多月了，快放假了还没有跑出来，引物设计一直特异性不高，怎么办啊，哪位大神帮设计一下，引物序列： ATGAAGAGAGATCACCGGGATACCTGCACGGATCAAAATGGTTCCAAGGGCGAATACTCGTCGTCCTCATCCTCAGTGCTGAATGGCAAGGCCAAAATTTGGGGACAAGACCAAGATGGCTGCGGCGGCAGTGGCGGCGGCGGCGGCGGCATGGATGAGTTGCTCGCCGTTTTGGGTTACAAGGTTCGGGCCTCAGACATGGCCGAGGTGGCGGAGAAGCTCGAGCAGCTGGAGATGGTCATGGGCTCTGCTCAGGAAGATGGGATTTCTCAGCTTTCTGATACAGTCCACTACAACCCATCTGATCTCTCCGGCTGGGTTCAGAGCATGCTCTCTGAGTTCAACACGGTTGACGGGTCAGCAATCGACGACCCACTTTTTGTTGCAGCTGGTTCTTCCTCAATCACCTCCATACATTTCTCCAATTCTCACCAGATTGAAAACCCAGCATCTCGGGTTTTCCACGACGATTCGGAATACGATCTCAGAGCAATTCCTGGCGTTGCGGCTTACCCACAAACCCATTTGGACTCGGAGGCTGAGAGCAGGAGAAAGCGATTGAAAACCGCAATTGGGTCCAATTCAATCGGGTCGAATTCCGGGGTTGGAGCCGACTCGGATTCTGTATCGGACCCAGCTCGGCCTCTGGTCCTGGTTGACTCACAAGAAACAGGCGTTAGACTCGTCCATACACTCGTGGCTTGTGCTGAGGCTGTTCAGCAAGAGAACCTGAAGCTCGCAGACGCGCTAGTGAAGCACGTGGGTCTACTCGCGGCCTCCCAAGCCGGCGCTATGAGAAAAGTCGCCACTTACTTTGCCGAAGCTCTGGCTCGTCGAATTTACCGAATTTACCCTCAGGACAGTCTGGATTCTTCATATTCAGATATTCTCCAGATGCACTTTTACGAGACCTGCCCCTATCTCAAGTTTGCTCACTTCACCGCAAACCAGGCCATTCTCGAAGCCTTTGCCACGGCAAGTAGAGTCCACGTCATTGATTTTGGGCTTAAGCAGGGGATGCAATGGCCAGCGCTCATGCAGGCCCTAGCATTGAGGCCCGGCGGGCCGCCCGCGTTTCGGCTTACAGGAATTGGCCCGCCGCAGCCCGACAACACGGACGCCTTGCAGCAGGTGGGATGGAAGCTGGCCCAATTGGCCGAAACTATTGGCGTAGAGTTTGAATTTCGGGGATTCGTCGCAAATAGTTTGGCAGATCTCGAACCCTCGATGCTCGAGATCCGCCCTCCAGATGTCGAGACAGTGGCGGTGAACTCGTGTTTTGAGCTCCACCCTCTCCTGGCTCGACCCGGGGCGGTTGAAAAGGTCTTGTCATCAATCAAGGCTATGAAGCCTAAGATTGTGACAATTGTGGAGCAGGAGGCAAACCATAATGGACCGATTTTCCTGGACCGGTTCAACGAGGCCTTGCATTATTACTCCAACTTGTTTGACTCGCTGGAGGGATCGTCCGGTCCGAGTCAGGATTTGGTCATGTCCGAGGTGTACTTGGGTCGACAGATATGCAACGTGGTAGCATGTGAAGGTCAGGACCGAGTCGAGCGACACGAGACTCTGACTCAGTGGCGAGGTCGGATGGACTCGGCCGGGTTCGACCTGGTTCACCTCGGGTCGAACGCGTTCAAGCAGGCCAGTATGTTGCTGGCTCTTTTCGCCGGCGGAGATGGGTACAGGGTGGAGGAGAACAATGGGTCTCTCATGCTTGGGTGGCACACACGGCCCCTCATAGCCACCTCAGCATGGCAGCTGGCGAGTTCGACTGAGTCAACCCGGTGA

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1楼 2016-01-19 13:31:08
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lifechuteng

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问您的物种是什么？我来给您设计
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2楼2016-01-19 14:13:46
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lifechuteng

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-01-20 23:10:17
Prunus mume DELLA mRNA是这个吗？
PREDICTED: Prunus mume DELLA protein GAI (LOC103328576), mRNA

product length = 113
Forward primer  1    AGCAATCGACGACCCACTTT  20
Template        637  ....................  656

Reverse primer  1    AATCGTCGTGGAAAACCCGA  20
Template        749  ....................  730
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3楼2016-01-19 14:20:13
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纳米之心

木虫 (文坛精英)
祝福楼主
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火星人要回火星了！！！
4楼2016-01-19 14:26:57
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美亿美生物

捐助贵宾 (职业作家)

技术服务-实验代做
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
内容已删除
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5楼2016-01-19 14:37:47
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hnnh123

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-20 23:10:35
荧光引物设计需要所检测物种的同源基因同时建库以提高特异性的吧，只有目的序列应该不行的。
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6楼2016-01-19 16:54:34
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吕木木

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lifechuteng at 2016-01-19 14:20:13
Prunus mume DELLA mRNA是这个吗？
PREDICTED: Prunus mume DELLA protein GAI (LOC103328576), mRNA

product length = 113
Forward primer  1    AGCAATCGACGACCCACTTT  20
Template        637  .......... ...

是的

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7楼2016-01-20 20:01:14
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吕木木

新虫 (小有名气)
好像你设计的这个不错唉，我试试，谢啦

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8楼2016-01-20 20:07:57
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吕木木

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lifechuteng at 2016-01-19 14:20:13
Prunus mume DELLA mRNA是这个吗？
PREDICTED: Prunus mume DELLA protein GAI (LOC103328576), mRNA

product length = 113
Forward primer  1    AGCAATCGACGACCCACTTT  20
Template        637  .......... ...

但似乎是的三个以上相同碱基太多，会不会产生错配啥的

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9楼2016-01-20 20:09:47
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吕木木

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 纳米之心 at 2016-01-19 14:26:57
祝福楼主

谢谢

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10楼2016-01-20 23:37:14
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