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原核基因敲除 已有3人参与
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最近刚开始做原核敲除，对质粒进行PCR后DpnI消除模板，结果会有两条带，暂且命名为上，和DpnI消化产物，对其都回收后发现bp相近，那哪个是消化好的呢？求大神指教，图1左200bp DNA ladder,DpnI消化产物，双酶切。图2左MAKER，DpnI胶回收，酶切回收，上回收  发自小木虫IOS客户端 |
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2楼2016-01-15 09:28:41
3楼2016-01-15 12:30:22
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6楼2016-01-15 13:18:31
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你问的是质粒构建问题，和敲除无关。 DpnI只是去除模板，跟你产物又无关；位置不同的两条带，回收以后又跑到一起啦？如果是这样，我猜测，上面条带是你PCR产物DNA结合蛋白比如DpnI或别的什么造成，与下面条带没什么区别，你都收了就好。 如果我理解的不对，你还是去问师姐吧… 发自小木虫Android客户端 |
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9212068楼2016-01-15 17:04:29
原海亮
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