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RNA提取过程DNA干扰问题-用于RT-PCR 已有2人参与
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各位好,我提取的植物叶片RNA,用的 the Fruit mate for RNA purification (Takara, China)。提取完也进行了检测,无DNA杂质。 但是发了文章,审稿专家说Takara公司提取的RNA必须用DNAaseI进行处理。 问题是我没有样品了。当初我也进行了DNA检测,证明了RNA的纯度。希望分子这块的专家能从专业水平帮我想想该如何进行回复审稿意见?? |
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RNA提取问题解答 |
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2楼2016-01-13 19:16:29
3楼2016-01-13 20:35:46
4楼2016-01-14 09:28:07
5楼2016-01-16 20:09:57
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请问,我在验证DNA有无污染的时候,可不可以这样:新合成的RNA,用普通PCR的含Taq酶的Mix来进行相关基因的扩增,如果跑胶之后有阳性结果,是不是说明我提的RNA里面有DNA污染??这么问题困扰我了好久,希望您能为我解答,谢谢~\(≧▽≦)/~ 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-01-16 21:12:06
原来,是这样
金虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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不能用跑电泳的方式判断是否有无DNA残留,必须要用DNA酶消化,微量的DNA跑胶是看不到的,而且用分光光度计是检测不出来的,对你反转录之后的cDNA有几率产生干扰,所以那个审稿的的确很严谨,我们老师也是要求我们必须做DNA的消化。 发自小木虫Android客户端 |
7楼2016-01-16 23:20:50
xiaoweiwei121
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8楼2016-01-17 04:26:19
9楼2016-01-17 06:50:58














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