应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA提取过程DNA干扰问题-用于RT-PCR
51/1返回列表
查看: 2041  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

荞麦tao

新虫 (小有名气)

[求助] RNA提取过程DNA干扰问题-用于RT-PCR 已有2人参与

各位好，我提取的植物叶片RNA，用的 the Fruit mate for RNA purification (Takara, China)。提取完也进行了检测，无DNA杂质。
但是发了文章，审稿专家说Takara公司提取的RNA必须用DNAaseI进行处理。
问题是我没有样品了。当初我也进行了DNA检测，证明了RNA的纯度。希望分子这块的专家能从专业水平帮我想想该如何进行回复审稿意见？？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

RNA提取问题解答

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2016-01-13 18:05:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘书杰

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引物，设计跨越至少一个内含子、根据产物大小就可以排除dna干扰。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2016-01-17 06:50:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

反应链

新虫 (正式写手)
How did you detect the DNA contaminants?

In general, it must be set up a negative control, which was omitted reverse transcriptase for DNA contaminant detection.

RNA提取过程DNA干扰问题-用于RT-PCR
赞一下 回复此楼
2楼2016-01-13 19:16:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

荞麦tao

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 反应链 at 2016-01-13 19:16:29
How did you detect the DNA contaminants?

In general, it must be set up a negative control, which was omitted reverse transcriptase for DNA contaminant detection.

...

我跑的电泳，并用分光广度进行检测的。这样可以吗？
赞一下 回复此楼
3楼2016-01-13 20:35:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

反应链

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 荞麦tao at 2016-01-13 20:35:46
我跑的电泳，并用分光广度进行检测的。这样可以吗？...

No. Those methods can't detect the extremely small amount of genomic DNA, which could affect the result of RT-PCR.

You must redo RNA preparation with DNaseI treated, otherwise you should submit your paper to the journal with lower IF.
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

荞麦tao
4楼2016-01-14 09:28:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭