应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA提取过程DNA干扰问题-用于RT-PCR
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1911  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

荞麦tao

新虫 (小有名气)

[求助] RNA提取过程DNA干扰问题-用于RT-PCR 已有2人参与

各位好，我提取的植物叶片RNA，用的 the Fruit mate for RNA purification (Takara, China)。提取完也进行了检测，无DNA杂质。
但是发了文章，审稿专家说Takara公司提取的RNA必须用DNAaseI进行处理。
问题是我没有样品了。当初我也进行了DNA检测，证明了RNA的纯度。希望分子这块的专家能从专业水平帮我想想该如何进行回复审稿意见？？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

RNA提取问题解答

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2016-01-13 18:05:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘书杰

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引物，设计跨越至少一个内含子、根据产物大小就可以排除dna干扰。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2016-01-17 06:50:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

反应链

新虫 (正式写手)
How did you detect the DNA contaminants?

In general, it must be set up a negative control, which was omitted reverse transcriptase for DNA contaminant detection.

RNA提取过程DNA干扰问题-用于RT-PCR
赞一下 回复此楼
2楼2016-01-13 19:16:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

荞麦tao

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 反应链 at 2016-01-13 19:16:29
How did you detect the DNA contaminants?

In general, it must be set up a negative control, which was omitted reverse transcriptase for DNA contaminant detection.

...

我跑的电泳，并用分光广度进行检测的。这样可以吗？
赞一下 回复此楼
3楼2016-01-13 20:35:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

反应链

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 荞麦tao at 2016-01-13 20:35:46
我跑的电泳，并用分光广度进行检测的。这样可以吗？...

No. Those methods can't detect the extremely small amount of genomic DNA, which could affect the result of RT-PCR.

You must redo RNA preparation with DNaseI treated, otherwise you should submit your paper to the journal with lower IF.
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

荞麦tao
4楼2016-01-14 09:28:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工专硕306分找合适调剂 +11 沧海轻舟e 2026-04-06 11/550 2026-04-07 10:07 by flydream1314
[考研] 080500求调剂 +11 黄宇博 2026-04-06 11/550 2026-04-07 07:53 by 0谦谦0
[考研] 277求调剂 数一104分 +9 瓶子PZ 2026-04-05 13/650 2026-04-06 23:48 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿哈工大，初试329，求环境科学与工程调剂！ +6 余未辛 2026-04-06 6/300 2026-04-06 20:51 by lbsjt
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 生物学求调剂 +5 15064154688 2026-04-03 5/250 2026-04-06 11:56 by lijunpoly
[考研] 一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂 +13 努力奋斗112 2026-04-04 13/650 2026-04-06 07:13 by jj987
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:06 by imissbao
[考研] 313求调剂 +3 海日海日 2026-04-04 3/150 2026-04-05 07:48 by 544594351
[考研] 一志愿上海大学生物学346 +3 上海大学346调剂 2026-04-03 3/150 2026-04-04 20:20 by dongzh2009
[考研] 一志愿华南师范361分，化学求调剂 +7 Nicole88888 2026-04-01 7/350 2026-04-04 18:28 by macy2011
[考研] 求调剂，一志愿南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕 +10 @taotao 2026-04-03 10/500 2026-04-04 09:01 by T可可西里T
[考研] 336求调剂 +8 kiyy 2026-04-01 8/400 2026-04-03 19:41 by lijunpoly
[考研] 材料专硕322分 +13 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 13/650 2026-04-03 16:08 by 哦哦123
[考研] 085600专硕材料与化工348分求调剂 +10 上学啦！ 2026-04-01 11/550 2026-04-03 14:13 by 百灵童888
[考研] 314求调剂 +11 1xiaojun23 2026-03-31 12/600 2026-04-02 12:31 by 1xiaojun23
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +3 cs0106 2026-04-02 5/250 2026-04-02 11:37 by olim
[考研] 322求调剂 +8 三水sss 2026-04-01 8/400 2026-04-01 10:19 by 唐沐儿
[考研] 求调剂：一志愿：南京大学 专业：0705 总分320 ，本科985，四六级已过 +3 lfy760306 2026-03-31 3/150 2026-04-01 01:57 by Creta
[考研] 070300化学专业279调剂 +10 哈哈哈^_^ 2026-03-31 10/500 2026-03-31 23:13 by liu823948201
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭