应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 类风湿性关节炎的滑膜细胞提取蛋白后做western blot，就是 不出条带。求助大神。
81/1返回列表
查看: 1821  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

806203391

铜虫 (小有名气)

[求助] 类风湿性关节炎的滑膜细胞提取蛋白后做western blot，就是 不出条带。求助大神。 已有1人参与

1.蛋白量足够。蛋白浓度每个上样300ug
2.胶片显影以后，就是没有条带。显影后的pvdf膜用考马斯亮蓝染色后，有很明显的蛋白条带。
3.对应marker转到膜上，颜色还很鲜艳。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
慎独。
1楼 2015-12-22 14:06:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
下次加上阳性对照

本身量表达很少
赞一下 回复此楼
2楼2015-12-23 10:51:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

806203391

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2015-12-23 10:51:38
下次加上阳性对照

本身量表达很少

蛋白检测浓度后，然后wb每孔上样60ug。我上样上了3组，每组带一个marker。跑完，组1用考马斯亮蓝染色，如图。然后组2组3的胶用来转膜，然后组2的膜用立春红染色，如图，pvdf膜上是有marker的，由于光线问题，不是很明显。组三的用来显影，目前还没出结果，显影结束跟你讨论，谢谢。
类风湿性关节炎的滑膜细胞提取蛋白后做western blot，就是 不出条带。求助大神。
IMG_20151229_142252.jpg


类风湿性关节炎的滑膜细胞提取蛋白后做western blot，就是 不出条带。求助大神。-1
1451370522209.jpg
赞一下 回复此楼
慎独。
3楼2015-12-29 14:30:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

806203391

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2015-12-23 10:51:38
下次加上阳性对照

本身量表达很少

您看一下图，膜上的maker还是比较明显的，但是立春红染色后并没有条带。对应分子量的marker转过来了，可是不知道为什么就没有蛋白呢。谢谢你。
赞一下 回复此楼
慎独。
4楼2015-12-29 14:32:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

806203391

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2015-12-23 05:51:38
下次加上阳性对照

本身量表达很少

湿转。条件：恒流300mA，电压在70v上下，17min。目的蛋白分子量48。谢谢你。
赞一下 回复此楼
慎独。
5楼2015-12-29 15:13:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

806203391

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2015-12-23 05:51:38
下次加上阳性对照

本身量表达很少

这是显影的照片。。虽然没被立春红染色成功，但是出现条带了。尽管很少。不过这应该就是转膜的问题了。。
赞一下 回复此楼
慎独。
6楼2015-12-29 20:00:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

806203391

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 806203391 at 2015-12-29 09:32:31
您看一下图，膜上的maker还是比较明显的，但是立春红染色后并没有条带。对应分子量的marker转过来了，可是不知道为什么就没有蛋白呢。谢谢你。...

。
类风湿性关节炎的滑膜细胞提取蛋白后做western blot，就是 不出条带。求助大神。-2
IMG_20151229_195715.jpg
赞一下 回复此楼
慎独。
7楼2015-12-29 20:02:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ztt279

新虫 (初入文坛)
你好，你的滑膜细胞是从老鼠体内获得的吗？是小鼠还是大鼠？我的是小鼠，计划从滑膜组织中提取，但是小鼠的滑膜特别难取，可以给下建议吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-10-26 23:26:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 806203391 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +4 Tide man 2026-08-11 4/200 2026-08-12 00:39 by liuqidi
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭