24小时热门版块排行榜    

查看: 1806  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

806203391

铜虫 (小有名气)

[求助] 类风湿性关节炎的滑膜细胞提取蛋白后做western blot,就是 不出条带。求助大神。 已有1人参与

1.蛋白量足够。蛋白浓度每个上样300ug
2.胶片显影以后,就是没有条带。显影后的pvdf膜用考马斯亮蓝染色后,有很明显的蛋白条带。
3.对应marker转到膜上,颜色还很鲜艳。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

慎独。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

806203391

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2015-12-23 10:51:38
下次加上阳性对照

本身量表达很少

蛋白检测浓度后,然后wb每孔上样60ug。我上样上了3组,每组带一个marker。跑完,组1用考马斯亮蓝染色,如图。然后组2组3的胶用来转膜,然后组2的膜用立春红染色,如图,pvdf膜上是有marker的,由于光线问题,不是很明显。组三的用来显影,目前还没出结果,显影结束跟你讨论,谢谢。
类风湿性关节炎的滑膜细胞提取蛋白后做western blot,就是 不出条带。求助大神。
IMG_20151229_142252.jpg


类风湿性关节炎的滑膜细胞提取蛋白后做western blot,就是 不出条带。求助大神。-1
1451370522209.jpg

慎独。
3楼2015-12-29 14:30:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
下次加上阳性对照

本身量表达很少
2楼2015-12-23 10:51:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

806203391

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2015-12-23 10:51:38
下次加上阳性对照

本身量表达很少

您看一下图,膜上的maker还是比较明显的,但是立春红染色后并没有条带。对应分子量的marker转过来了,可是不知道为什么就没有蛋白呢。谢谢你。
慎独。
4楼2015-12-29 14:32:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

806203391

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2015-12-23 05:51:38
下次加上阳性对照

本身量表达很少

湿转。条件:恒流300mA,电压在70v上下,17min。目的蛋白分子量48。谢谢你。
慎独。
5楼2015-12-29 15:13:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:22 by oEVWOejN9taj
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:19 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:47 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:22 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:02 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 15:59 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:42 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:39 by oEVWOejN9taj
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:22 by oEVWOejN9taj
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:07 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +11 且听虎啸 2026-08-07 14/700 2026-08-08 12:50 by 布布和一二
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 10:19 by 3OOjAIS77qg2
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 面上提前没消息,有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
信息提示
请填处理意见