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JULIA606

新虫 (小有名气)

[求助] PCR后琼脂糖凝胶电泳的胶浓度与DNA ladder 大小有什么关系呢? 已有7人参与

各位大侠,新手最近因实验需要基因鉴定进行PCR后电泳,目的基因在290-370bp之间,目前用的100bp ladder,1%琼脂糖,跑了几次后发现 ladder在目的段跑的不是很开,区分不大,不知道琼脂糖凝胶电泳的胶浓度与DNA ladder 大小有什么关系呢?鉴于经验有限,再次请教各位,期待大家的建议与指导~~!~O(∩_∩)O~
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JULIA606

新虫 (小有名气)

引用回帖:
43楼: Originally posted by joeming123 at 2015-12-18 16:17:52
胶有煮好么? 一般是煮到没有可见固体,像你这样,总是看不清ladder,不妨试试 多煮沸几次。  还有胶粉最好买点,比较好的。...

谢谢 我们的胶粉是好的,现在都是煮80ml,就是感觉微波控制不好,煮到透明态时胶液总会减少,剩50-60ml左右,现在是用保鲜膜封住烧杯口,有用枪头扎眼、也有留口尝试,都是这样。按照有人建议的补水至原重试过,感觉并没有溶后直接凝胶的效果好。我用1%和1.5%的浓度制胶的效果还可以,ladder比较好看,就是不知道为什么按照小片段高浓度胶这一规律就不太对头。。。现在算是能得到比较好看的结果,再次感谢啦~O(∩_∩)O~
45楼2015-12-19 10:13:09
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oliviashane

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-12-17 15:03:02
膠的?舛扰c目的基因的大小有關,bp數大的用?舛鹊偷哪z跑,阻力小跑的快,反之bp數小的就用高?舛鹊哪z,跑得慢,條帶分離的清楚。

发自小木虫IOS客户端
2楼2015-12-16 01:44:37
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JULIA606

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by oliviashane at 2015-12-16 01:44:37
膠的?舛扰c目的基因的大小有關,bp數大的用?舛鹊偷哪z跑,阻力小跑的快,反之bp數小的就用高?舛鹊哪z,跑得慢,條帶分離的清楚。

打算试试不同浓度的胶跑跑ladder看
3楼2015-12-16 08:44:16
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Heao_

新虫 (初入文坛)

4楼2015-12-16 11:09:46
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